[發明專利]新幾內亞鳳仙的快速繁殖方法

無效

• 申請號: 02115314.0
• 申請日: 2002-05-31
• 公開（公告）號: CN1379973A
• 公開（公告）日: 2002-11-20
• 發明（設計）人: 彭永宏;李進進
• 申請（專利權）人: 華南師范大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 廣州粵高專利代理有限公司
• 代理人: 何燕玲

本發明涉及新幾內亞鳳仙的快速繁殖方法，具體的講，是指采用組織培養技術對新幾內亞鳳仙進行快速繁殖的方法。

廣義來說，組織培養不僅包括無菌條件下利用人工培養基對植物組織的培養，而且包括對原生質體、懸浮細胞和植物器官的培養。很早以來，專家們根據植物材料的不同，把組織培養分為五種類型，即：1.愈傷組織培養；2.懸浮細胞培養；3.器官培養(胚、花藥、子房、根和莖的培養等)；4.莖尖分生組織培養；5.原生質體培養。其中愈傷組織培養是一種最常見的培養形式。

新幾內亞鳳仙(英文名：Guinea?Impriens)原產非洲南部，馴化品種株形緊密，矮生，花朵直徑大。為多年生草本花卉，枝葉質地較硬，葉片對生，葉表有光澤，葉脈清晰，葉片有綠色、深綠色和古銅色，花朵左右對稱，花瓣五片，不等大?；ㄉr艷，花色品種多，包括橙紅色、紅色、猩紅色、粉色、紫紅色、白色等十八種花色。新幾內亞鳳仙性喜疏松及透氣性良好的土壤，花期長(可達四個半月)。適合盆栽、地栽、家適擺設及園林布置。

新幾內亞鳳仙可以通過種子得到幼苗，其優點是根系比較發達，后期生長快，但育苗期較長(從播種到開花約15周)，播種時易受土壤條件、氣候條件、溫濕度等的影響，往往發芽率較低，而且種子較貴，成本高。另外，目前人們還采用扦插方式來進行幾內亞鳳仙的繁殖，其優點是開花早，生長周期較短(從扦插到開花約12周)。但扦插時生根率較低，而且需材量大，成本高，花期難以整齊一致。因此，以上兩種方法都不利于新幾內亞鳳仙的快速與大量繁殖。組織培養作為一種新的繁殖方式，目前已經成為許多植物快速繁殖的首選方案，但目前還沒有關于新幾內亞鳳仙組織培養方面的報道。

本發明的目的在于針對目前新幾內亞鳳仙培養方法的不足，提供一種采用組織培養技術對新幾內亞鳳仙進行快速繁殖的方法，該方法具有取材少、繁殖率高、成本低、成苗整齊一致、遺傳穩定性好等特點，可以進行大規模的工廠化生產。

本發明的方法依次包括如下步驟：(1)選擇外植體進行滅菌處理；(2)經滅菌的外植體通過誘導產生愈傷組織；(3)愈傷組織經培養產生叢生芽并進行增殖；(4)將叢生芽培養為成苗并進行移栽管理。

本發明的較佳方案是步驟(1)到(4)中的某一個步驟采用下列方案，其它步驟采用本領域的通用方法：

(1)外植體的選擇與滅菌：選用新幾內亞鳳仙嫩葉或莖尖用8％-10％新潔爾滅浸泡5-10分鐘(用min表示，下同)，清水洗凈后，用70％酒精浸25-35min，之后用8％-10％的NaClO殺菌10-15min，然后用0.2％-0.3％升汞殺菌5-10min，最后用無菌水沖洗3次。

(2)愈傷組織的誘導：采用MS培養基，激素濃度為：BA?1-3mg/L、NAA?0-1mg/L，溫度為25-28℃，外植體遮光5～7天(用d表示，下同)后再進行光照，光照強度2000-2500勒克斯(用lx表示，下同)，再培養8-15d后可產生愈傷組織。

(3)叢生芽的產生及增殖：采用1/2MS培養基，激素采用IAA?0-1mg/L，BA?1-2mg/L。培養溫度為25-28℃，光照強度為2500-3000lx，培養時間為15-20d。

(4)成苗培養及移栽管理：將叢生芽接種到1/2MS+IBA?0.1-0.4mg/L的培養基上，10-16d可生根并形成完整植株，接著讓其適應環境后移栽于用塑料薄膜遮蓋的環境中進行生長。

本發明的更優方案是步驟(1)到(4)均采用上述的方案。

本發明的最佳方案是步驟(2)中BA的濃度為2mg/L，NAA的濃度為0.3mg/L；步驟(3)中IAA的濃度為0.2mg/L，BA的濃度為1.0mg/L；步驟(4)中IBA濃度為0.2mg/L。

在步驟(4)中，所用培養基中加入2g/L的活性炭能提高成苗培養的效果，移栽時要用塑料薄膜遮蓋6-7d，保持環境濕度80％以上，移栽后10～15d開始施肥，每周一次，用0.2％KH₂PO₄葉面噴施。

在上述配方中，MS培養基是最常用的培養基，一般從有關植物組織培養的書都可找到其配方。BA代表6-芐基氨基嘌呤，NAA為萘乙酸，IAA為吲哚乙酸，IBA為吲哚丁酸，它們都是組織培養方面常用的藥物，可以通過購買得到。

本發明方法具有如下優點及效果：

1.取材少，繁殖率高，成苗整齊，花期易達到一致。

2.可以避開夏天高溫對幼苗生長的不適應，新幾內亞鳳仙只要不遇嚴寒或因氣溫較高引起生長不良，可以持續盛花。