[發明專利]瘋草中苦馬豆素的提純工藝

無效

• 申請號: 02114590.3
• 申請日: 2002-05-24
• 公開（公告）號: CN1396161A
• 公開（公告）日: 2003-02-12
• 發明（設計）人: 曹光榮;童德文;趙寶玉;葛鵬斌
• 申請（專利權）人: 楊凌大農生物技術有限公司
• 主分類號: C07D311/58
• 分類號: C07D311/58
• 代理公司: 西安通大專利代理有限責任公司
• 代理人: 李鄭建

一、所屬領域

本發明屬于天然產物化學研究領域，涉及天然產物提取、分離和鑒定方法，特別涉及一種瘋草中苦馬豆素的提純工藝。

二、背景技術

瘋草(locoweed)是豆科棘豆屬(Oxytopis)和黃芪屬(Astragalus)有毒植物的總稱，是世界范圍內危害草原畜牧業最嚴重的毒草。在俄羅斯、加拿大、摩洛哥、澳大利亞、墨西哥、西班牙、巴西、埃及、冰島等國家均有分布。在我國，瘋草類植物有44種，主要分布于內蒙古、寧夏、甘肅、青海、新疆、西藏、陜西、四川等省區，分布面積超過400萬公頃，每年因瘋草中毒所造成的經濟損失就高達12億元以上。因此，在世界范圍內，有關瘋草及瘋草病的研究已成為眾多學者的研究熱點。國外，關于瘋草有毒成分的研究已有80多年歷史，突破性進展始于澳大利亞學者Colegate1979年用a-甘露糖甙酶作為工具酶首次從灰苦馬豆中分離出吲哚茲定生物堿—苦馬豆素。這是人類首次得到苦馬豆素(swainsonine)，并將其正式命名。1982年美國學者Molyneux從斑莢黃芪和絹毛棘豆中分離鑒定出苦馬豆素和氧化氮苦馬豆素(swainsonine?N-oxide)，并確定了瘋草的有毒成分就是苦馬豆素。

國內對瘋草有毒成分的研究起步較晚。20世紀80年代初期，國內學者主要進行了草地瘋草種類、種群地理分布的資源調查。80年代中期開始了瘋草有毒成分的分離研究，1989年曹光榮等首次從我國黃花棘豆中分離鑒定出苦馬豆素，并證明是其主要有毒成分。在隨后的十幾年間，主要是曹光榮課題組及其培養的博士、碩士研究生圍繞我國甘肅棘豆、黃花棘豆、莖直黃芪、寬苞棘豆變異黃芪等瘋草系統地開展了研究工作，相繼取得了一些突破性進展，主要有：從多種瘋草類植物中分離并鑒定出苦馬豆素；多種瘋草類植物中苦馬豆素的定量分析；改進了苦馬豆素的提取工藝及其參數；此項研究成果，在1996年獲得農業部科技進步三等獎。

國外分離提純苦馬豆素的主要技術工藝是先將植物樣品在有機溶劑中浸提，再將浸提物過陽離子交換柱和瓊脂糖凝膠柱，最后重結晶獲得苦馬豆素。其不足是提取率低，不能批量生產。國內在苦馬豆素提純的主要技術工藝方面尚屬空缺。

三、發明內容

針對上述現有技術中存在的缺陷和不足，本發明的目的在于，提供一種瘋草中苦馬豆素的提純工藝，本提純工藝采用陽離子交換柱層析、硅膠柱層析，分段升華等技術，最后獲得苦馬豆素，這樣可使苦馬豆素的提取率增加，產品純度提高。增強市場的竟爭力，促進苦馬豆素作為抗腫瘤藥物及免疫增強劑等開發的產業化。

為了實現上述目的，本發明所采用的技術方案是，瘋草中苦馬豆素的提純工藝，其特點是，根據苦馬豆素的基本理化特性，首先采用陽離子交換法提取出大極性生物堿粗品，再用堿性氯仿抽提，抽提部分經硅膠柱層析分離得到苦馬豆素粗品，最后分步升華獲得苦馬豆素純品。

本發明的具體提純工藝分以下五個階段完成：

第一步，浸膏提取階段：用工業甲醇從瘋草類植物中提取出有機成分總浸膏。

第二步，粗生物堿提取階段：采用陽離子交換法提取出粗生物堿。

第三步，苦馬豆素粗品提取階段：采用溶劑抽提法提取出苦馬豆素粗品。

第四步，苦馬豆素提取階段：采用硅膠柱層析提取出苦馬豆素。

第五步，苦馬豆素純化階段：采用分步升華法提取出苦馬豆素純品。

本發明的提純工藝提取成本低，產品純度高，且苦馬豆素提取率明顯優于國外技術。

四、附圖說明

圖1是本發明的苦馬豆素提純工藝流程圖；

圖2是本發明的苦馬豆素光譜數據曲線圖；光譜數據：UVλ_max：289

(log4.67)，249(log3.83)；

圖3是本發明的苦馬豆素IR光譜圖；光譜數據：IR^max(KBr)cm^-1：3431，3370(-OH)，2946，2806(CH)，2806～2725(Bohlman?band)，1074(C-O)等吸收峰；

圖4是苦馬豆素MS光譜圖；光譜數據：EIMSm/e：173(M⁺)，155(M-H₂O)，138(M-H₂O-OH)，116，115，96，84，72，43(母核裂解碎片峰)。

五、具體實施方式

為了更清楚的理解本發明，以下結合附圖和實施例對本發明作進一步的詳細說明。