[發(fā)明專利]帶有分離器的免疫色譜分析設(shè)備

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 01804143.4
• 申請日: 2001-01-25
• 公開（公告）號: CN1397021A
• 公開（公告）日: 2003-02-12
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 關(guān)明;陳曉熒;T·P·周;A·R·佩雷拉;聞秉權(quán)
• 申請（專利權(quán)）人: 基因?qū)嶒?yàn)室診斷私人有限公司
• 主分類號: G01N33/558
• 分類號: G01N33/558;G01N33/569
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司
• 代理人: 程偉

相關(guān)申請的交叉引用

本申請要求申請日為2000年1月28日、申請?zhí)枮?9/493,408的美國專利申請的優(yōu)選權(quán)，該申請在這里以參考的形式結(jié)合進(jìn)本申請。

技術(shù)領(lǐng)域

用作快速分析設(shè)備的色譜分析系統(tǒng)是多種用來檢測生物樣本中給定分析物的一種裝置。這些系統(tǒng)的一個優(yōu)點(diǎn)在于這些分析的進(jìn)行不用其它的專業(yè)設(shè)備或經(jīng)過專業(yè)訓(xùn)練的人員。另一個優(yōu)點(diǎn)是：采用這類分析方法可以檢測出多種分析物。業(yè)已發(fā)現(xiàn)，采用這些技術(shù)的分析設(shè)備非常適用于“關(guān)鍵”場所，如醫(yī)生的辦公室或家用設(shè)備中，因此，用來檢測生物樣本中分析物的快速色譜技術(shù)已經(jīng)發(fā)展到走出臨床試驗(yàn)的階段。

背景技術(shù)

通常的快速色譜測試采用“夾層”分析或“競爭性”分析來檢測所需分析物的存在。在夾層分析中，分析物被粘在或“夾”在未標(biāo)記的第一結(jié)合對和標(biāo)有標(biāo)記的第二結(jié)合對之間。例如，一種分析物如HIV的抗體可被第一結(jié)合對捕獲，這時，一種HIV抗原被固定在一隔膜上。然后這種抗體—抗原的聯(lián)合體就能被帶有標(biāo)記的第二結(jié)合對如另一種標(biāo)有有色顆粒的HIV抗原檢測出來。

與之相反，在競爭性分析中，樣本中的分析物與標(biāo)記分析物或類似標(biāo)記了的分析物相競爭以便將結(jié)合對固定在固態(tài)載體上。樣本中分析物的濃度越大，分析所形成的信號越小，這是因?yàn)闃?biāo)記分析物從固態(tài)載體上的結(jié)合對被競爭掉了(即競爭分析中產(chǎn)生的信號隨著樣本中分析物濃度的增加而降低)。因此，夾層分析所提供的定性評估具有更高的靈敏度，而競爭性分析對分析物的濃度提供定量的結(jié)果。

除了所用的分析物檢測方法之外，當(dāng)前可獲得的快速分析設(shè)備通常被劃分成三種基本形式：“量尺”形式(dipstick?format)、“通流”形式(flow?through)和“側(cè)流”形式(1ateral?flow)。“量尺”形式(如美國專利5,275,785、5,504,013、5,602,040、5,622,871、5,656,503所披露)通常由一條多孔材料構(gòu)成，該材料具有一個樣本接收端、一個試劑區(qū)和一個反應(yīng)區(qū)。樣本沿著分析設(shè)備從樣本接收端通過毛細(xì)作用流到試劑區(qū)中。被檢測的分析物結(jié)合到試劑區(qū)中的試劑上，優(yōu)選地為已被標(biāo)記的結(jié)合對上從而形成一個聯(lián)合體。通常這些結(jié)合組為抗體：抗原聯(lián)合體或者是一種具有標(biāo)記如加到聯(lián)合體試劑部分中的膠態(tài)金屬的受體：配體聯(lián)合體。然后將標(biāo)記的結(jié)合對—抗原聯(lián)合體移入反應(yīng)區(qū)中，這里聯(lián)合體被另一種特定的、牢牢固定在反應(yīng)區(qū)的結(jié)合對捕獲。標(biāo)記聯(lián)合體在反應(yīng)區(qū)內(nèi)的停留可形成可見的結(jié)果。

“通流”形式(參見美國專利US402,0046)同樣也采用多孔固體材料。這種分析形式通常具有一個多孔隔膜，其中該隔膜具有位于吸附層上的固定有結(jié)合對。樣本一旦被加到隔膜表面，相關(guān)分析物就會與所固定的結(jié)合對反應(yīng)并形成分析物—結(jié)合對聯(lián)合體。在加入第二種具有標(biāo)記如酶、一種或多種染色顆粒或各種膠體金屬的結(jié)合對后，就可看見該聯(lián)合體。吸附層用作多余分析試劑的接收器，其用來調(diào)節(jié)反應(yīng)劑的流速從而在分析物和結(jié)合對之間達(dá)到最佳的反應(yīng)條件。在這種形式下，通過采用額外的溶液來“沖洗”隔膜以減少標(biāo)記的非特定結(jié)合或者去掉其它任何可以干涉分析結(jié)果的材料，就能提高結(jié)果的靈敏度。

“側(cè)流”形式(參見美國專利US5,075,078、5,096,837、5,354,692和5,229,073)采用一種多孔的固體材料并具有一種與量尺分析形式類似的線性結(jié)構(gòu)：樣本加入?yún)^(qū)、試劑釋放區(qū)以及反應(yīng)區(qū)。然而不同于樣本通過毛細(xì)作用垂直升高的“量尺”作用，側(cè)流形式能使樣本從側(cè)面流過多孔固體材料。該樣本直接加到加入?yún)^(qū)，并且相關(guān)的分析物從側(cè)面流到試劑釋放區(qū)，然后就形成一種帶有標(biāo)記了的結(jié)合對的聯(lián)合體。然后將分析物：結(jié)合對的聯(lián)合體移入反應(yīng)區(qū)，并在反應(yīng)區(qū)中被第二種固定了的結(jié)合對捕獲并檢測出來。

人們非常喜歡使用傳統(tǒng)的這種快速分析方法來確定“關(guān)鍵”點(diǎn)樣本中給定分析物的存在，這是因?yàn)檫@種方法使用起來相對比較簡單，不用專門的設(shè)備和專業(yè)人員，并能在很短的時間內(nèi)產(chǎn)生結(jié)果。例如，用來檢測傳染病如AIDS的簡便快速免疫分析設(shè)備就已存在近十年了。然而，現(xiàn)有的快速測試都具一些缺點(diǎn)。特別是由于現(xiàn)有的形式都存在各種限制條件，因此這類設(shè)備的靈敏度總是遭到質(zhì)疑(參見Giles等人于1999在Journal?of?Medical?Virology?59：104-109發(fā)表的文章)。此外，由于其分析形式設(shè)計的內(nèi)在問題，這些分析設(shè)備在使用時總會有一些實(shí)際的限制，這將在下面舉例說明。