[發(fā)明專利]ATP再生反應(yīng)系統(tǒng)、利用該系統(tǒng)的腺苷酸的檢驗方法、RNA檢測方法和ATP放大方法

無效

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• 申請日: 2001-01-17
• 公開（公告）號: CN1395619A
• 公開（公告）日: 2003-02-05
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 大竹久夫;黑白章夫;田中正太郎
• 申請（專利權(quán)）人: 株式會社佐竹;大竹久夫;黑田章夫
• 主分類號: C12P19/32
• 分類號: C12P19/32;C12Q1/48;C12Q1/66;C12Q1/68
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司
• 代理人: 曹雯,孟凡宏

1.ATP再生反應(yīng)系統(tǒng)，其特征在于，在微量ATP存在下，將腺苷酸激酶作用于AMP，使其轉(zhuǎn)換為2分子ADP，然后在多磷酸化合物(n)(式中n是磷酸基數(shù))存在下，將多磷酸合成酶作用于該2分子ADP，使其轉(zhuǎn)換為2分子ATP和1分子多磷酸化合物(n-2)。

2.ATP再生反應(yīng)系統(tǒng)，其特征在于，在多磷酸化合物(n)(式中n是磷酸基數(shù))存在下，將磷酸基轉(zhuǎn)移酶作用于AMP，使其轉(zhuǎn)換為ADP和多磷酸化合物(n-1)，然后在該多磷酸化合物(n-1)存在下，將多磷酸合成酶作用于上述ADP，使其轉(zhuǎn)換為ATP和多磷酸化合物(n-2)。

3.依賴于生物發(fā)光的腺苷酸的檢驗方法，該方法是在熒光素和溶解氧存在下，將熒光素酶作用于ATP，進而生成AMP并發(fā)光，通過測定生成的發(fā)光量對腺苷酸進行檢驗的方法；

其特征在于，具備在微量的ATP存在下，將腺苷酸激酶作用于AMP，使其轉(zhuǎn)換為2分子的ADP，然后在多磷酸化合物(n)(式中n是磷酸基數(shù))存在下，將多磷酸合成酶作用于該2分子ADP，使其轉(zhuǎn)換為2分子ATP和1分子多磷酸化合物(n-2)的ATP再生反應(yīng)系統(tǒng)，該ATP再生反應(yīng)系統(tǒng)的特征在于，微量ATP為來自污染的ATP。

4.依賴于生物發(fā)光的腺苷酸的檢驗方法，該方法是在熒光素和溶解氧存在下，將熒光素酶作用于ATP，進而生成AMP并發(fā)光，通過測定生成的發(fā)光量對腺苷酸進行檢驗的方法；

其特征在于，具備在多磷酸化合物(n)(式中n是磷酸基數(shù))存在下，將磷酸基轉(zhuǎn)移酶作用于AMP，使其轉(zhuǎn)換為ADP和多磷酸化合物(n-1)，然后在該多磷酸化合物(n-1)存在下，將多磷酸合成酶作用于上述ADP，使其轉(zhuǎn)換為ATP和多磷酸化合物(n-2)的ATP再生反應(yīng)系統(tǒng)。

5.依賴于生物發(fā)光檢測RNA的方法，該方法是通過RNA分解酶對樣品中的RNA進行分解，進而得到單核苷酸，將該單核苷酸中的AMP轉(zhuǎn)換為ATP，并在熒光素和溶解氧存在下，將熒光素酶作用于該ATP，測定生成的發(fā)光量對RNA中的AMP進行定量的方法；

其特征在于，具備在多磷酸化合物(n)(式中n是磷酸基數(shù))存在下，將磷酸基轉(zhuǎn)移酶作用于AMP，使其轉(zhuǎn)換ADP和多磷酸化合物(n-1)，然后在該多磷酸化合物(n-1)存在下，將多磷酸合成酶作用于上述ADP，使其轉(zhuǎn)換為ATP和多磷酸化合物(n-2)的ATP再生反應(yīng)系統(tǒng)。

6.級聯(lián)放大ATP的方法，其特征在于，反復(fù)進行在微量ATP存在下，將腺苷酸激酶作用于AMP，使其轉(zhuǎn)換為2分子ADP，然后在多磷酸化合物(n)(式中n是磷酸基數(shù))存在下，將多磷酸合成酶作用于該2分子ADP，使其轉(zhuǎn)換為2分子ATP和1分子多磷酸化合物(n-2)的步驟。

7.腺苷酸的檢驗方法，該方法是在熒光素和溶解氧存在下，將熒光素酶作用于ATP，進而生成AMP并發(fā)光，然后通過測定生成的發(fā)光量對腺苷酸進行檢驗的方法；

其特征在于，反復(fù)進行在被檢驗物中含有的ATP存在下，將腺苷酸激酶作用于AMP，使其轉(zhuǎn)換為2分子ADP，然后在多磷酸化合物(n)(式中n是磷酸基數(shù))存在下，將多磷酸合成酶作用于該2分子ADP，使其轉(zhuǎn)換為2分子ATP和1分子多磷酸化合物(n-2)的步驟，將ATP級聯(lián)放大后，在熒光素和溶解氧存在下，將熒光素酶作用于放大的ATP，進而生成AMP并發(fā)光。