[發明專利]呋喃丹半抗原、抗原和抗體及其制備方法

無效

• 申請號: 01117639.3
• 申請日: 2001-04-30
• 公開（公告）號: CN1384103A
• 公開（公告）日: 2002-12-11
• 發明（設計）人: 朱國念;吳銀良;程敬麗;胡秀卿;楊挺
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: C07D307/86
• 分類號: C07D307/86;C07K16/00
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司
• 代理人: 張法高

本發明涉及雜環化合物及其制備方法，尤其涉及一種呋喃丹半抗原、抗原和抗體及其制備方法。

農藥及其代謝產物傳統的殘留分析方法主要是依靠氣相色譜(GC)，液相色譜(HPLC)或質譜等物化分析手段，但由于農藥使用規模不斷擴大，農藥殘留造成環境影響和對人類健康的慢性和長期效應日益受到人們關注和擔憂，對農藥殘留的限制也因此越來越嚴格，對分析測定對象、種類、數量、范圍、指標等諸方面都提出了新的要求和更高的標準，但傳統的理化分析方法通常繁瑣復雜，樣品前處理過程復雜、工作量大、儀器昂貴、要求有熟練的技術人員及較長的分析周期。因此人們迫切希望有一種簡單、快速、靈敏及價廉的檢測技術能在野外和實驗室內進行大批量的篩選試驗。免疫分析法正具備這些優點，所以盡管免疫分析應用于農藥殘留分析的時間很短，但已很快用于環境樣品和食品中農藥殘留的分析。

1958年Berson?S.A和Yallow創立了放射免疫分析法(RIA)，并首先在生物醫學和臨床藥物定量測定得到廣泛應用。由于農藥殘留分析對象的復雜性，直到八十年代免疫分析才被逐漸應用于這一領域，免疫分析技術可達到傳統理化分析技術無法達到的選擇性和靈敏度，并且，快速、簡便，適于檢測生物大分子，也可以檢測復雜樣本中小分子如農藥等痕量組分。

第一個農藥免疫分析的報道是1967年Centen等人制備的農藥馬拉硫磷的抗血清，通過抗原抗體沉淀反應，證明了抗血清與馬拉硫磷的可反應性。從1967年到70年代末的10余年間，由于技術上的局限，盡管已開發出了幾個農藥的免疫分析方法，但仍未受到普遍重視，發展相當緩慢。進入80年代以來，由于人們對分析方法的選擇性和靈敏度的要求越來越高，同時對分析對象的種類和環境樣品的數量要求也在不斷增加，具有高度特異性、靈敏性、快速性的免疫檢測技術在農藥分析領域得到了較快的發展。進入90年代以來，農藥的免疫檢測技術發展迅速，到目前為止，已有60多種農藥開發了免疫檢測技術，其中除草劑和殺蟲劑較多，殺菌劑較少。國內這方面的研究也漸漸起步，已有關于對硫磷、三唑酮、禾大壯、甲胺磷、莠去津均三氮苯類等農藥的半抗原合成的報道。

呋喃丹(Carbofuran，2，3，-二氫-2，2-二甲基-7-苯并呋喃基-N-甲基氨基甲酸酯)自1969年由FMC公司和Mobay化學公司開發生產后即作為一種高效、廣譜的殺蟲、殺線蟲劑，在世界范圍內廣泛應用于糧食、蔬菜、水果及經濟作物等害蟲的防治。但是由于呋喃丹的毒性大，在酸性土壤中不易降解，極易污染土壤和地下水源。近年來，由于呋喃丹造成的環境生物毒害，屢見不鮮。尤其是在作物和蔬菜上的大量使用，形成農藥殘留，對人體健康造成極大的危害，這已引起人們的關注。因此開發一種簡單、快速，適于農藥殘留現場監控的痕量分析方法具有重要的現實意義。

檢測呋喃丹殘留量常規方法有氣相色譜法(GC)和高效液相色譜法(HPLC)。由于呋喃丹在通常氣相色譜條件下易分解成酚類，用GC分析易產生較大誤差，當然這個問題可通過改變操作條件或將農藥衍生化來解決。目前指定的檢測N-甲基氨基甲酸酯類農藥的較靈敏的方法是用帶熒光檢測器的HPLC柱后衍生化法。然而這些方法的靈敏度受樣品的凈化，濃縮，衍生化等步驟的影響很大；再者這些方法需要大多數實驗室所不具備的復雜的儀器，且過程繁瑣，不適合大批量樣品的檢測與分析。免疫分析為呋喃丹殘留研究提供了一個新的分析檢測途徑。

本發明的目的是提供一種特異性、靈敏度、準確度高，精確度好、操作方法簡單快速的呋喃丹半抗原、抗原和抗體及其制備方法。

為了達到上述目的，本發明采取下列措施：

呋喃丹半抗原的分子結構為：

n為從1至20的任意自然數

呋喃丹抗原的分子結構為：

呋喃丹抗體是能與呋喃丹發生特異性免疫反應的免疫球蛋白。

一種呋喃丹半抗原的制備方法的步驟為：

1)呋喃酚1份溶解在1～4份甲苯中，通入光氣1～2份，加氫氧化鈉至溶液呈堿性，反應溫度為-10～10℃，反應得到一混合物；

2)將上述混合物進行液-液分配，然后經減壓濃縮得呋喃酚和產物的油狀混合物，此油狀混合物待冷卻后析出一無色結晶，即為2，3-二氫-2，2-二甲基-7-苯并呋喃基氯甲酸酯；