[發明專利]一種多肽——骨骼發育相關蛋白－43.23和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 01113169.1
• 申請日: 2001-06-29
• 公開（公告）號: CN1393459A
• 公開（公告）日: 2003-01-29
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C07K14/47
• 分類號: C07K14/47;C07K14/435;C07K16/18;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C07H21/04;C12P21/02;G01N33/68;C12Q1/68;A61K38/17;A61K31/7088;A61P35/00;A61P7/00;A61P31/18;A61P31/00;A61P37/02
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本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——骨骼發育相關蛋白-43.23，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

本發明公開了一種新的多肽——骨骼發育相關蛋白-43.23，編碼此多肽的多核苷酸和經DNA重組技術產生這種多肽的方法。本發明還公開了此多肽用于診治多種疾病的方法，如多指(趾)，并指(趾)畸形，馬碲內翻足，多囊腎，異位腎，馬碲腎等。本發明還公開了抗此多肽的拮抗劑及其診治作用。本發明還公開了編碼這種新的骨骼發育相關蛋白-43.23的多核苷酸的用途。

在脊髓動物的骨骼發育中，尚未分化的間葉細胞分化形成軟骨細胞是一個重要的過程。研究發現，鼠的胚胎纖維原細胞鏈C3H10T1/2，在特殊的培養條件和處置下會分化成下列細胞的任何一種：肌細胞，脂肪細胞，造骨細胞和軟骨細胞。最近，從尚未分化的C3H10T1/2分離克隆出一條新基因cors26，(Maeda?T，Abe?M，KurisuK，Jikko?A，Furukawa?S.Osaka?University，1-8?Yamadaoka，Suita，Osaka?565-0871，Japan.)此基因編碼了26-kDa的蛋白。CORS26的氨基酸序列由246個氨基酸組成，在氨基末端并含有一個包含成膠域的分泌信號肽縮氨酸(Gly-X-Y?repeats)，在COOH端含有含有一個完整的C1q球狀域，CORS26在結構上和脂肪動員激素特效性蛋白很接近。由于和補體因子亞單位C1q結構上很相似，所以它被認為是C1q蛋白家族成員。Northern?blot分析發現CORS26的mRNA在發育中的肋骨組織中濃度很高而在成熟的軟骨細胞中并沒有發現，所以它被認為是早期的骨骼發育中的分泌蛋白，為了進一步闡明CORS26蛋白在骨骼發育過程中的功能作用，以發育中的鼠軟骨作為研究對象，證明CORS26既對于軟骨發育非常重要，而且對于C3H10T1/2的分化形成也至關重要。因此，CORS26的這種特性將軟骨發育和細胞分化發育相聯系起來，對于骨骼的分布及其生長清晰度具有相當重要的決定作用。

本發明的人的基因屬于C1q蛋白家族，在蛋白水平上與CORS26有36％的相同性及62％的相似性。基于以上各點，故認為本發明的蛋白為CORS26，命名為骨骼發育相關蛋白-43.23。并以此推斷其與CORS26相似，并具有相似的生物學功能。在體內，其表達異常可引起軟骨發育和細胞分化發育異常，進而導致與軟骨發育和細胞分化發育功能紊亂相關的疾病的發生。

由于如上所述骨骼發育相關蛋白-43.23蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的骨骼發育相關蛋白-43.23蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新骨骼發育相關蛋白-43.23蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽——骨骼發育相關蛋白-43.23以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼骨骼發育相關蛋白-43.23的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼骨骼發育相關蛋白-43.23的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產骨骼發育相關蛋白-43.23的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽——骨骼發育相關蛋白-43.23的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽——骨骼發育相關蛋白-43.23的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與骨骼發育相關蛋白-43.23異常相關的疾病的方法。

本發明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO：2氨基酸序列的多肽。

本發明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。