[發明專利]一種癲癇相關蛋白編碼序列,其編碼的多肽、制法及用途

無效

• 申請號: 01112999.9
• 申請日: 2001-05-28
• 公開（公告）號: CN1343774A
• 公開（公告）日: 2002-04-10
• 發明（設計）人: 余龍;蔣建明
• 申請（專利權）人: 復旦大學
• 主分類號: C12N15/12
• 分類號: C12N15/12;C12N15/63;C12N15/70;C12N15/79;C07K14/47;C07H21/02;C12P21/02;C12Q1/68
• 代理公司: 上海正旦專利代理有限公司
• 代理人: 陸飛

本發明涉及一種新的多核苷酸，由該多核苷酸編碼的多肽，這些多核苷酸和多肽的應用，以及所述多核苷酸和所述多肽的生產方法。更具體地說，本發明涉及癲癇相關基因(seizure-related?gene，SEZ)家族的一個新成員。

癲癇是一種常見的發作性神志異常疾病，平均每200人中就有一人是該病患者(BrainRes(2000)857(1-2)：286-290)，因病人在發作時有類似羊的叫吼聲，故俗稱″羊癲瘋″。該病發作時，病人突然倒地，不省人事，口吐涎沫，兩目上翻，四肢抽搐，或口中啼叫有聲，昏迷時間不等，醒后恢復正常；也有一過性的精神惚恍，兩目鈍呆，或肢體抽搐等癥狀，這種發作往往無定時。

由于癲癇發作的不定時性、長期性、多發性及其帶來的學習記憶障礙，一旦確診后病人就需要長期治療和隨訪，因此診斷癲癇是一個很嚴肅的問題。目前該病主要是通過臨床觀察并記錄腦電圖進行診斷，但是該方法有其局限性，如：對一般病人而言，由于頭皮電極所記錄到的癲癇樣電活動可能不來自電極下，而為遠處病灶所致，所以腦電圖很難及時精確顯示癲癇樣電活動。對該癥的治療通常采用化學藥劑，尤以神經遞質類藥物較佳，然而神經遞質藥物的毒副作用很大；此外該病也可采用手術治療，由于該病患者在腦部通常存在病灶，所以手術治療有一定的的危險性。

病理分析表明，病變中央部位的神經細胞壞死、缺失，而鄰近部位呈現神經元群結構紊亂、膠質增生并可有供血障礙。同時，病灶中谷氨酸脫羧酶減少，GABA合成增加，此外，發作時先有細胞外鈣離子的減少，繼以細胞外鉀離子的增加，前者破壞細胞膜的穩定性，后者阻撓細胞內鈣離子的外流，延長去極化的時程。

由于常規醫療手段的缺點及病理機制的進一步揭曉，越來越多的人致力于從遺傳學角度，即通過研究與神經細胞電位相關的基因來診斷和治療癲癇，SEZ基因家族就是近年來發現的與癲癇發生有密切關系的一類基因。1995年，Shimizu?Nishicawa?K等人從小鼠的大腦皮層細胞制成的cDNA文庫中克隆并表達了小鼠的SEZ-6基因(Bioche?Biophys?Res?Commun(1995)28(2)：201-210)；1995年，Kzjiwara?K等人發現小鼠SEZ-17(PTZ-17)的RNA注射到Xenopus?oocyte中會引起細胞內的鈣離子凝集(Brain?Res(1995)671：170-174)；1996年，KzjiwaraK等人在對小鼠大腦皮進行差異雜交時分離得到了SEZ-12基因(Bioche?BiophysRes?Commun(1996)222：144-148)；Nishioca?M在2000年分離克隆到人的SEZ-6L基因(Oncogene(2000)19(54)：6551-6560)。雖然已知的SEZ家族成員已有很多，但是到目前為止，尚沒有人報導過本發明的人SEZ-6編碼序列或其多肽。

本發明的一個目的是提供一種新的多核苷酸，該多核苷酸編碼SEZ基因家族的一個新成員，被命名為hSEZ-6(human?seizure-related?gene?6)。

本發明的另一個目的是提供一種新的SEZ基因家族成員基因產物，該蛋白被命名為hSEZ-6。

本發明的再一個目的是提供一種利用重組技術生產所述的新的人SEZ蛋白的方法。

本發明還涉及這種人SEZ蛋白的應用。

在本發明的一個方面，提供了一種分離出的DNA分子，它包括：編碼具有人SEZ-6蛋白活性的多肽的核苷酸序列，所述的核苷酸序列與SEQ?ID?NO：1中從核苷酸180-3167位的核苷酸序列有至少80％的同源性；或者所述的核苷酸序列能在中度嚴緊條件下與SEQ?ID?NO：1中從核苷酸180-3167位的核苷酸序列雜交。

在本發明中，“分離”或“純化”的DNA是指，該DNA或片段已從天然狀態下位于其兩側的序列中分離出來，還指該DNA或片段已經與天然狀態下伴隨核酸的組份分開，而且已經與在細胞中伴隨其的蛋白質分開。

在本發明的另一方面，提供了一種分離的SEZ-6蛋白多肽，它包括：具有SEQ?ID?NO：2氨基酸序列或其活性片段、其活性衍生物。