[發(fā)明專利]一種多肽——人反轉(zhuǎn)錄相關(guān)蛋白－15.07和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 01112908.5
• 申請日: 2001-05-17
• 公開（公告）號: CN1386758A
• 公開（公告）日: 2002-12-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權(quán)）人: 上海博德基因開發(fā)有限公司
• 主分類號: C07K14/47
• 分類號: C07K14/47;C07K16/18;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C07H21/00;C12P21/02;G01N33/68;C12Q1/68;A61K38/17;A61K31/7088;A61P35/00;A61P7/00;A61P31/18;A61P31/00;A61P37/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體地說，本發(fā)明描述了一種新的多肽——人反轉(zhuǎn)錄相關(guān)蛋白-15.07，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發(fā)明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應(yīng)用。

本發(fā)明公開了一種新的多肽——人反轉(zhuǎn)錄相關(guān)蛋白-15.07，編碼此多肽的多核苷酸和經(jīng)DNA重組技術(shù)產(chǎn)生這種多肽的方法。本發(fā)明還公開了此多肽用于診治多種疾病的方法，如先天性流產(chǎn)、腭裂、先天性臍疝、胃癌、肝癌、肺癌等。本發(fā)明還公開了抗此多肽的拮抗劑及其診治作用。本發(fā)明還公開了編碼這種新的人反轉(zhuǎn)錄相關(guān)蛋白-15.07的多核苷酸的用途。

靈長類動物和嚙齒動物基因組中包含一個L1家族，有高度重復(fù)的、長的并且交替出現(xiàn)的序列，這個家族的序列特征是在3’-末端有一段富含A的序列，5’-末端是平末端結(jié)構(gòu)，區(qū)別于一般的粘性末端結(jié)構(gòu)，但是并不影響其轉(zhuǎn)錄整合過程，并且有較長的開放閱讀框(ORFs)存在。L1家族成員存在于不同類型的細(xì)胞中，其中包括多功能胚胎細(xì)胞，這就證明了L1家族起源于同一種序列編碼蛋白，通過一個RNA介導(dǎo)的過程散布到基因組中。L1家族參與反轉(zhuǎn)錄過程，反轉(zhuǎn)錄起始于3’-末端，終止于互補(bǔ)DNA插入物引起的重疊位點(diǎn)，它能夠通過轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)換成cDNA，然后經(jīng)過類似于假基因加工的過程插入到染色體中。

在人類的基因組中，L1因子存在于染色體1q的LRE2上。在結(jié)構(gòu)上，L1因子沒有很長的末端重復(fù)序列，其3’-末端的多聚A尾巴比較特殊，而且它并不是在每個L1因子上都固定不變。L1因子的增殖過程包括轉(zhuǎn)錄、反轉(zhuǎn)錄和再整合到基因組上的一個新的位點(diǎn)。L1因子的5’末端大多是平端結(jié)構(gòu)，區(qū)別于一般的粘性末端結(jié)構(gòu)，但是并不影響其轉(zhuǎn)錄整合過程。5’末端的非翻譯區(qū)域(UTR)含有一個內(nèi)在的促進(jìn)子，對于整個逆轉(zhuǎn)錄過程的速度進(jìn)行調(diào)節(jié)和控制。LRE2位點(diǎn)含有兩個完整的開放閱讀框(ORF1框和ORF2框)，其中的ORF1框編碼一個大約40Kd的胚胎癌細(xì)胞蛋白，ORF2框與逆轉(zhuǎn)錄酶和其它逆轉(zhuǎn)錄酶病毒蛋白有序列上的相似性，能夠介導(dǎo)逆轉(zhuǎn)錄過程的進(jìn)行。采用實(shí)驗(yàn)手段去除L1因子最前面的32Bp，得到的產(chǎn)物只能顯示出正常轉(zhuǎn)錄效率的20％。

L1家族序列的一個開放閱讀框與某些病毒的依賴RNA的DNA聚合酶有相似之處，更進(jìn)一步證明了L1家族或者它的祖先與反轉(zhuǎn)錄酶有關(guān)，它編碼的蛋白實(shí)際上是一種類反轉(zhuǎn)錄酶。

本發(fā)明的多肽與上述的L1因子的ORF2類反轉(zhuǎn)錄酶區(qū)域有68％的相同性，81％的相似性，并且包含了其特征性的保守序列，因此認(rèn)為此蛋白是一種新的L1因子ORF2相關(guān)的類反轉(zhuǎn)錄酶，具有與反轉(zhuǎn)錄酶相似的一些生物學(xué)功能，并命名為人反轉(zhuǎn)錄相關(guān)蛋白-15.07。含L1因子的ORF2類反轉(zhuǎn)錄酶家族的特征性序列，兩者具有相似的生物的學(xué)功能。它在體內(nèi)參與某些反轉(zhuǎn)錄過程及染色體中基因的插入與散播，對于遺傳變異是重要的。其表達(dá)異常通常與一些相關(guān)的物質(zhì)代謝紊亂性疾病、蛋白代謝紊亂性疾病及相關(guān)組織的腫瘤及癌癥等疾病的發(fā)生密切相關(guān)，并產(chǎn)生相關(guān)的疾病。

由于如上所述人反轉(zhuǎn)錄相關(guān)蛋白-15.07蛋白在調(diào)節(jié)細(xì)胞分裂和胚胎發(fā)育等機(jī)體重要功能中起重要作用，而且相信這些調(diào)節(jié)過程中涉及大量的蛋白，因而本領(lǐng)域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人反轉(zhuǎn)錄相關(guān)蛋白-15.07蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人反轉(zhuǎn)錄相關(guān)蛋白-15.07蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態(tài)下的作用提供了基礎(chǔ)。這種蛋白可能構(gòu)成開發(fā)疾病診斷和/或治療藥的基礎(chǔ)，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發(fā)明的一個目的是提供分離的新的多肽——人反轉(zhuǎn)錄相關(guān)蛋白-15.07以及其片段、類似物和衍生物。

本發(fā)明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發(fā)明的另一個目的是提供含有編碼人反轉(zhuǎn)錄相關(guān)蛋白-15.07的多核苷酸的重組載體。

本發(fā)明的另一個目的是提供含有編碼人反轉(zhuǎn)錄相關(guān)蛋白-15.07的多核苷酸的基因工程化宿主細(xì)胞。

本發(fā)明的另一個目的是提供生產(chǎn)人反轉(zhuǎn)錄相關(guān)蛋白-15.07的方法。

本發(fā)明的另一個目的是提供針對本發(fā)明的多肽——人反轉(zhuǎn)錄相關(guān)蛋白-15.07的抗體。

本發(fā)明的另一個目的是提供了針對本發(fā)明多肽——人反轉(zhuǎn)錄相關(guān)蛋白-15.07的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發(fā)明的另一個目的是提供診斷治療與人反轉(zhuǎn)錄相關(guān)蛋白-15.07異常相關(guān)的疾病的方法。

本發(fā)明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO：2氨基酸序列的多肽。