[發(fā)明專利]一種多肽——微管結合蛋白190－65.89和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 01112747.3
• 申請日: 2001-04-26
• 公開（公告）號: CN1382714A
• 公開（公告）日: 2002-12-04
• 發(fā)明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發(fā)有限公司
• 主分類號: C07K14/47
• 分類號: C07K14/47;C07K16/18;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C07H21/00;C12P21/02;G01N33/68;C12Q1/68;A61K38/17;A61K31/7088;A61P35/00;A61P7/00;A61P31/18;A61P31/00;A61P37/02
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本發(fā)明屬于生物技術領域，具體地說，本發(fā)明描述了一種新的多肽——微管結合蛋白190-65.89，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發(fā)明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

微管是真核細胞獨有并普遍存在的結構。在不同類型的細胞中微管具有相同的形態(tài)。大多數微管位于細胞質基質內，然而它們又是纖毛、鞭毛等運動器官完整組成的一部分，同時也是中心粒的組成部分。另外，微管在神經細胞內物質運輸中起到了重要的作用。許多的軸突營養(yǎng)物質，如小泡、蛋白質顆粒、肌動蛋白、包涵素、鈣調蛋白和其他代謝酶類等都是通過微管運輸的。除此以外，在細胞分裂時，染色體在赤道板上的排列以及向兩極的運動的動力也來源于微管蛋白的不斷的聚合以及解聚。(J?Bio1?Chem?1999?Aug?20；274(34)：24054-8)

微管是由α和β管蛋白和少量微管結合蛋白組成的。微管結合蛋白(MAPs)分為高分子量和低分子量兩類，高分子量(200-300kDa)主要包括MAP-1和MAP-2，低分子量主要為tau蛋白(55-62kDa)。MAPs多肽鏈是有兩個區(qū)段組成，一個區(qū)段是微管結合區(qū)，另一區(qū)段以橫橋方式與其它微管纖維連接。MAPs可促進微管的組裝，抑制其解聚，具有穩(wěn)定微管的作用。另外，MAPs還是信號傳導中的一個靶物，并且也是細胞周期中一個重要的引擎分子cdc-2激酶的靶物。在神經細胞中發(fā)現，軸突中微管的交聯(lián)主要是依賴于tau蛋白，而樹突中微管的交聯(lián)是依賴于MAP-2。(J.Cell?Biol.，1998，140(4)：897-910)

本發(fā)明的新的多肽與已知的微管結合蛋白在蛋白水平上具有33％的同源性和57％的相似性，并與之具有相似的結構特征，由此認為其是一種新的微管結合蛋白，命名為微管結合蛋白190-65.89，并與已知蛋白具有相似的生物學功能。該蛋白在生物體內促進微管的組裝，抑制其解聚，并且其還是信號傳導中的一個靶物，同時還是細胞周期中一個重要的引擎分子cdc-2激酶的靶物。其突變或表達異常將導致微管結構及功能異常，還會破壞信號傳導和細胞周期的正常運作，引起神經系統(tǒng)等各種相關疾病的發(fā)生。此外，該蛋白還可用于診斷及治療上述各種疾病。

由于如上所述微管結合蛋白190-65.89蛋白在調節(jié)細胞分裂和胚胎發(fā)育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節(jié)過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的微管結合蛋白190-65.89蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新微管結合蛋白190-65.89蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態(tài)下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發(fā)疾病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發(fā)明的一個目的是提供分離的新的多肽——微管結合蛋白190-65.89以及其片段、類似物和衍生物。

本發(fā)明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發(fā)明的另一個目的是提供含有編碼微管結合蛋白190-65.89的多核苷酸的重組載體。

本發(fā)明的另一個目的是提供含有編碼微管結合蛋白190-65.89的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發(fā)明的另一個目的是提供生產微管結合蛋白190-65.89的方法。

本發(fā)明的另一個目的是提供針對本發(fā)明的多肽——微管結合蛋白190-65.89的抗體。

本發(fā)明的另一個目的是提供了針對本發(fā)明多肽——微管結合蛋白190-65.89的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發(fā)明的另一個目的是提供診斷治療與微管結合蛋白190-65.89異常相關的疾病的方法。

本發(fā)明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO：2氨基酸序列的多肽。

本發(fā)明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，該多核苷酸的序列是選自下組的一種：(a)具有SEQ?ID?NO：1中116-1915位的序列；和(b)具有SEQ?ID?NO：1中1-2147位的序列。