[發明專利]一種多肽——核糖體蛋白L39－12.32和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 01112620.5
• 申請日: 2001-04-18
• 公開（公告）號: CN1381475A
• 公開（公告）日: 2002-11-27
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C07K14/47
• 分類號: C07K14/47;C07K16/18;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C07H21/00;C12P21/02;G01N33/68;C12Q1/68;A61K38/17;A61K31/7088;A61P35/00;A61P7/00;A61P31/18;A61P31/00;A61P37/02
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本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——核糖體蛋白L39-12.32，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

蛋白的正確翻譯對所有細菌及高等生物都是非常重要的，對蛋白翻譯調控機制的研究是從大腸桿菌中得到的。蛋白的翻譯過程主要由各種氨酰基-tRNA合成酶、各種tRNA及核糖體共同作用來完成，其中核糖體和其他輔助因子在一起提供了翻譯過程的全部酶活性，這些酶活性只有在核糖體整體結構完整的情況下才會具備。因而，核糖體及其組成的各亞單位在生物體內協同作用，起著重要的生理學功能。

核糖體是合成蛋白質的細胞器，其唯一功能是按照mRNA的指令由氨基酸合成多肽鏈，它被稱為核糖核蛋白體，簡稱為核蛋白體或核糖體。核糖體幾乎存在于一切細胞內，無論原核還是真核細胞，均有大量的核糖體存在。核糖體是一種顆粒狀結構，沒有膜包裹，其直徑為25nm，主要成分為蛋白質和RNA，核糖體RNA稱為rRNA，蛋白質含量約占40％，RNA約占60％。蛋白質分子主要分布在核糖體的表面，而rRNA則位于內部，兩者靠非共價鍵結合在一起。(細胞生物學?翟中和?高等教育出版社pp122-129)核糖體的功能研究將焦點放到了核糖體RNA上，有很多rRNA功能域決定著核糖體的不同功能。(Annu?Rev?Biochem?1991；60?191-227)

生物有機體細胞內有兩種基本類型的核糖體：一種是70S(S為Sverdberg沉降系數單位)的核糖體，所有的原核細胞的核糖體均為70S真核細胞線粒體與葉綠體內的核糖體也近似于70S。另一種是80S核糖體，真核細胞的核糖體(除線粒體與葉綠體核糖體外)均為80S。不論70S或80S的核糖體，均由大小不同的兩個亞單位構成。

核糖體大小亞單位在細胞內常常游離于細胞質基質中，只有當小亞單位與mRNA結合后大亞單位才與小亞單位結合形成完整的核糖體。肽鏈合成終止后，大小亞單位解離，又游離存在于細胞質基質中。

核糖體蛋白L39是核糖體大亞單位的結合蛋白之一，它和核糖體蛋白L39存在于絕大多數原核生物和真核生物細胞內。

在不同的生物中，編碼核糖體蛋白L39的基因已有很多得到克隆，包括哺乳動物、植物和酵母等等。(Lin?A.，McNally?J.，Wool?I.G.?J.?Biol.?Chem.259：487-490(1984))；(Leer?R.J.，van?Raamsdonk-Duin?M.M.C.，Kraakman?P.，Mager?W.H.，Planta?R.J.Nucleic?Acids?Res.13：701-709(1985))；(Ramirez?C.，Louie?K.A.，Matheson?A.T.FEBS?Lett.250：416-418(1989))

所有的核糖體蛋白L39的C末端均含有一保守的區域，該區域含有以下一致的序列片段：[KRA]-T-x(3)-[LIVM]-[KRQF]-x-[NHS]-x(3)-R-[NHY]-W-R-R。在眾多不同生物的核糖體蛋白L39中均含有這一序列片段，該片段可能在核糖體的作用過程中起重要的作用。這一結構基序在蛋白發揮正常生理學功能的過程中起著極為重要的作用。

核糖體蛋白L39對于蛋白質的翻譯過程有著重要的作用，如果缺失或對其進行化學修飾，或編碼它的基因發生突變，都會影響核糖體的功能，降低多肽合成的活性。雖然，對核糖體蛋白L39的功能研究還不夠透徹，但根據種種研究結果，可以證明，核糖體蛋白L39的功能包括：(1)對rRNA折疊成有功能的三維結構是十分重要的；(2)在蛋白質合成中，核糖體的空間構象發生一系列的變化，核糖體蛋白可能對核糖體的構象起“微調”作用；(3)在核糖體的結合位點上甚至可能在催化作用中，核糖體蛋白與rRNA共同行使功能。

根據核糖體蛋白L39的序列相似性，認為其屬于核糖體蛋白家族。該蛋白缺失將導致細胞生長速度減慢[J.Stephen?Gantt，Michael?D.Thompson，1990，J.Biol.Chem.，265：2763-2767]。因而，核糖體蛋白L39在由DNA轉錄、翻譯的細胞增殖過程中起著極為重要的作用。其表達異常將導致組織的生長速度減慢，從而引發各種發育紊亂性疾病，如發育遲緩等。