[發(fā)明專利]一種多肽——鋅指蛋白－9.13和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 01105936.2
• 申請日: 2001-04-10
• 公開（公告）號: CN1380336A
• 公開（公告）日: 2002-11-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 毛裕民;謝毅;顧永青
• 申請（專利權(quán)）人: 上海博德基因開發(fā)有限公司
• 主分類號: C07K14/47
• 分類號: C07K14/47;C07K16/18;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C07H21/00;C12P21/02;G01N33/68;C12Q1/68;A61K38/17;A61K31/7088;A61P35/00;A61P7/00;A61P31/18;A61P31/00;A61P37/02
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本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體地說，本發(fā)明描述了一種新的多肽——鋅指蛋白-9.13，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發(fā)明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應(yīng)用。

真核基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控對于基因的正常表達(dá)及發(fā)揮生物學(xué)功能是十分重要的，通常由轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子來完成這一過程。轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子在生物體內(nèi)參與決定基因在何種組織及何種發(fā)育階段開始轉(zhuǎn)錄，編碼這類蛋白的基因如發(fā)生突變，不但該基因自身不能正常表達(dá)，而且受其調(diào)節(jié)的許多基因也不能正常的進(jìn)行轉(zhuǎn)錄與表達(dá)。轉(zhuǎn)錄因子對基因表達(dá)的調(diào)控主要通過轉(zhuǎn)錄因子與特定的DNA序列結(jié)合、轉(zhuǎn)錄因子間的相互作用及轉(zhuǎn)錄因子與常規(guī)轉(zhuǎn)錄機(jī)構(gòu)的相互作用在完成。根據(jù)結(jié)構(gòu)基序的不同，已知的DNA結(jié)合蛋白有很多種類：(1)含有螺旋-轉(zhuǎn)角-螺旋基序的蛋白；(2)Cys-His鋅指蛋白；(3)Cys-Cys鋅指蛋白；(4)Leu拉鏈結(jié)構(gòu)蛋白等等。

鋅指蛋白是一種DNA結(jié)合蛋白，最早在非洲爪蟾RNA聚合酶III介導(dǎo)的5S?rRNA基因轉(zhuǎn)錄因子TF?III?A蛋白的氨基酸序列中發(fā)現(xiàn)。此后發(fā)現(xiàn)鋅指蛋白在不同生物的各種組織中均有表達(dá)，這些組織包括造血細(xì)胞、腦、神經(jīng)系統(tǒng)、表皮組織、各種與分泌吸收相關(guān)的組織及與腫瘤和無限增殖細(xì)胞系相關(guān)的組織等。據(jù)估計(jì)在人類基因組上鋅指蛋白基因超過了1％(Bellefroid?et?al.，1989；Pellegrino?and?Berg，1991)。

GATA家族是一個轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子家族，它可以被認(rèn)為屬于一種鋅指蛋白，它是一種Cys-Cys鋅指蛋白，其中，Zn²⁺與四個半胱氨酸殘基形成配位鍵，這一結(jié)構(gòu)域?qū)τ贕ATA轉(zhuǎn)錄因子蛋白結(jié)合DNA是必需的。GATA轉(zhuǎn)錄因子蛋白與DNA的結(jié)合依賴于DNA上的一段同樣的序列：(A/T)GATA(A/G)，GATA轉(zhuǎn)錄因子蛋白可以調(diào)控很多基因的表達(dá)。

這個家族的成員包括如下：GATA-1，GATA-2，GATA-3，GATA-4等等。

幾乎所有生物GATA家族的成員都有一對高度類似的鋅指結(jié)構(gòu)，其序列特征是：Cys-x2-Cys-x17-Cys-x2-Cys。進(jìn)一步的結(jié)構(gòu)研究發(fā)現(xiàn)，GATA家族成員都含有的是這樣一段高度保守的結(jié)構(gòu)域：C-x-[DN]-C-x(4，5)-[ST]-x(2)-W-[HR]-[RK]-x(3)-[GN]-x(3，4)-C-N-[AS]-C，其中，四個C所代表的半胱氨酸殘基是鋅指結(jié)構(gòu)的特征配基。這一結(jié)構(gòu)的高度性證明其對于GATA轉(zhuǎn)錄因子蛋白發(fā)揮正常的生理學(xué)功能有著重要的意義。

GATA-1，它可以結(jié)合于紅細(xì)胞中表達(dá)的球蛋白基因以及其他一些基因的GATA區(qū)域，它對于紅細(xì)胞的發(fā)育和其中基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控有重要作用；GATA-2，調(diào)控內(nèi)皮細(xì)胞中endothelin-1基因的表達(dá)；GATA-3，可以結(jié)合于T細(xì)胞受體的alpha和delta基因的增強(qiáng)子，其到調(diào)控功能；GATA-4，在內(nèi)皮起源的組織和心臟組織中表達(dá)。(TrainorC.D.，Evans?T.，F(xiàn)elsenfeld?G.，Boguski?M.S.Nature?343：92-96(1990))；(LeeM.E.，Temizer?D.T.，Clifford?J.A.，Quertermous?T.J.Biol.Chem.266：16188-16192(1991))；(Ho?I.-C.，Vorhees?P.，Marin?N.，Oakley?B.K.，Tsai?S.-F.，OrkinS.H.，Liden?J.M.EMBO?J.10：1187-1192(1991))；(Spieth?J.，Shim?Y.H.，Lea?K.，Conrad?R.，Blumenthal?T.Mol.Cell.Biol.11：4651-4659(1991))

當(dāng)然，對人GATA轉(zhuǎn)錄因子蛋白的結(jié)構(gòu)和功能的研究還有待進(jìn)一步開展，具體的內(nèi)容請參閱相關(guān)文獻(xiàn)。(Molecular?And?Cellular?Biology，Sep?1991?4651-4659)

綜上所述，人GATA轉(zhuǎn)錄因子蛋白對于很多基因的表達(dá)調(diào)控有著重要的意義，在人的生命活動過程中起著極其重要的作用。

由于如上所述鋅指蛋白-9.13蛋白在機(jī)體內(nèi)重要功能中起重要作用，而且相信這些調(diào)節(jié)過程中涉及大量的蛋白，因而本領(lǐng)域中一直需要鑒定更多參與這些過程的鋅指蛋白-9.13蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新鋅指蛋白-9.13蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態(tài)下的作用提供了基礎(chǔ)。這種蛋白可能構(gòu)成開發(fā)疾病診斷和/或治療藥的基礎(chǔ)，因此分離其編碼DNA是非常重要的。