[發(fā)明專利]一種多肽——光敏色素蛋白－9.35和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 01105904.4
• 申請(qǐng)日: 2001-04-10
• 公開（公告）號(hào): CN1380315A
• 公開（公告）日: 2002-11-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 毛裕民;謝毅
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海博德基因開發(fā)有限公司
• 主分類號(hào): C07K14/47
• 分類號(hào): C07K14/47;C07K16/18;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12Q1/68;C07H21/00;C12P21/02;G01N33/68;A61K38/17;A61K31/7088;A61P35/00;A61P7/00;A61P31/18;A61P31/00;A61P37/02
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本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體地說，本發(fā)明描述了一種新的多肽——光敏色素蛋白-9.35，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發(fā)明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應(yīng)用。

植物光敏色素是一個(gè)由特異光感受器分子組成的家族，這些光感受器被植物用于監(jiān)測(cè)環(huán)境中的光信號(hào)。這些光感受器與其它的光信號(hào)感受器一起，使植物得以根據(jù)光線的強(qiáng)弱、有無等變化隨時(shí)調(diào)整自己的生長發(fā)育向著最有利于俘獲光能的方向發(fā)展。植物光敏色素通過光感受器分子獲得光信息，指導(dǎo)光感受器分子進(jìn)行由光引導(dǎo)的、可逆的兩種形式間的相互轉(zhuǎn)換反應(yīng)。這兩種形式是：Pr(對(duì)于波長為665nm的紅外光吸收最有效)以及Pfr(對(duì)于波長為730nm的遠(yuǎn)紅外光吸收最有效)。光引發(fā)的Pfr能夠啟動(dòng)一個(gè)轉(zhuǎn)導(dǎo)過程，該轉(zhuǎn)導(dǎo)過程能夠使適合于外界環(huán)境條件的調(diào)節(jié)植物形態(tài)的基因表達(dá)達(dá)到最高狀態(tài)。

每一個(gè)植物光敏色素分子都是由兩個(gè)約125kDa的多聚肽組成的二聚物，每一個(gè)多聚肽又折疊成兩個(gè)主要的結(jié)構(gòu)域：一個(gè)NH₂-末端區(qū)域，含有一個(gè)共價(jià)連接的四吡咯載色體；一個(gè)COOH-末端區(qū)域，一個(gè)二聚反應(yīng)的介質(zhì)[Quail?P.H.(1997)BioEssays19(7)：571-579]。NH₂-末端區(qū)域的載色體與一段高度保守的特征性序列片段上的半胱氨酸相連接。

已有研究發(fā)現(xiàn)集胞藻屬菌株P(guān)CC6803具有一個(gè)類似于植物光敏色素蛋白的結(jié)構(gòu)域，并且同樣結(jié)合了一個(gè)載色體。

所有的光敏色素蛋白序列中均含有如下所示的高度保守的一致性序列片段：[RGS]-[GSA]-[PV]-H-x-C-H-x(2)-Y；其中的半胱氨酸殘基即為載色體的連接位點(diǎn)。該位點(diǎn)的突變將導(dǎo)致光敏色素蛋白的活性的喪失，從而影響該蛋白在生物體內(nèi)活性的發(fā)揮。

由于如上所述光敏色素蛋白-9.35蛋白在機(jī)體內(nèi)重要功能中起重要作用，而且相信這些調(diào)節(jié)過程中涉及大量的蛋白，因而本領(lǐng)域中一直需要鑒定更多參與這些過程的光敏色素蛋白-9.35蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新光敏色素蛋白-9.35蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態(tài)下的作用提供了基礎(chǔ)。這種蛋白可能構(gòu)成開發(fā)疾病診斷和/或治療藥的基礎(chǔ)，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發(fā)明的一個(gè)目的是提供分離的新的多肽——光敏色素蛋白-9.35以及其片段、類似物和衍生物。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供含有編碼光敏色素蛋白-9.35的多核苷酸的重組載體。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供含有編碼光敏色素蛋白-9.35的多核苷酸的基因工程化宿主細(xì)胞。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供生產(chǎn)光敏色素蛋白-9.35的方法。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供針對(duì)本發(fā)明的多肽——光敏色素蛋白-9.35的抗體。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供了針對(duì)本發(fā)明多肽——光敏色素蛋白-9.35的模擬化合物、拮抗劑、激動(dòng)劑、抑制劑。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供診斷治療與光敏色素蛋白-9.35異常相關(guān)的疾病的方法。

本發(fā)明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO：2氨基酸序列的多肽。

本發(fā)明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補(bǔ)的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，該多核苷酸的序列是選自下組的一種：(a)具有SEQ?ID?NO：1中199-456位的序列；和(b)具有SEQ?ID?NO：1中1-1832位的序列。

本發(fā)明另外涉及一種含有本發(fā)明多核苷酸的載體，特別是表達(dá)載體；一種用該載體遺傳工程化的宿主細(xì)胞，包括轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)或轉(zhuǎn)染的宿主細(xì)胞；一種包括培養(yǎng)所述宿主細(xì)胞和回收表達(dá)產(chǎn)物的制備本發(fā)明多肽的方法。

本發(fā)明還涉及一種能與本發(fā)明多肽特異性結(jié)合的抗體。

本發(fā)明還涉及一種篩選的模擬、激活、拮抗或抑制光敏色素蛋白-9.35蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本發(fā)明的多肽。本發(fā)明還涉及用該方法獲得的化合物。

本發(fā)明還涉及一種體外檢測(cè)與光敏色素蛋白-9.35蛋白異常表達(dá)相關(guān)的疾病或疾病易感性的方法，包括檢測(cè)生物樣品中所述多肽或其編碼多核苷酸序列中的突變，或者檢測(cè)生物樣品中本發(fā)明多肽的量或生物活性。