[發(fā)明專利]一種新的多肽——核糖體蛋白S19－35.53和編碼這種多肽的多核苷酸

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 01105100.0
• 申請(qǐng)日: 2001-01-05
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN1363608A
• 公開(kāi)（公告）日: 2002-08-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 毛裕民;謝毅
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海博德基因開(kāi)發(fā)有限公司
• 主分類號(hào): C07K14/47
• 分類號(hào): C07K14/47;C07K16/18;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/02;G01N33/68;C12Q1/68;A61K38/17;A61K31/7088;A61P35/00;A61P7/00;A61P31/18;A61P31/00;A61P37/02
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本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體地說(shuō)，本發(fā)明描述了一種新的多肽——核糖體蛋白S19-35.53，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發(fā)明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應(yīng)用。

核糖體是蛋白合成的加工場(chǎng)所，其在生物體內(nèi)不斷地沿著mRNA移動(dòng)，以極快的速度合成肽鏈。核糖體蛋白按照一定的順序與rRNA結(jié)合以及蛋白質(zhì)之間的相互結(jié)合，組裝成兩個(gè)核糖體亞基---一個(gè)大亞基和一個(gè)小亞基，其中大亞基約是小亞基的兩倍，而rRNA直接參與mRNA和tRNA的結(jié)合。核糖體和它的輔助因子結(jié)合在一起，擁有蛋白合成各階段所需要的全部酶活性。這些酶活性只有在核糖體整體結(jié)構(gòu)存在的情況下才具備，核糖體蛋白質(zhì)和rRNA都不能單獨(dú)參與蛋白合成反應(yīng)。

不論是真核生物還是原核生物，其核糖體都由大小兩個(gè)亞基組成，各種核糖體蛋白質(zhì)在大小亞基內(nèi)都有一定的位置，rRNA是其中的骨架。有的核糖體蛋白直接與rRNA結(jié)合，這些蛋白與rRNA結(jié)合后改變了rRNA的構(gòu)象，從而使另一些蛋白再與rRNA結(jié)合，是維持核糖體構(gòu)象的重要組成成分；而有些核糖體蛋白不直接與rRNA結(jié)合，而是結(jié)合在其他蛋白質(zhì)上，這些蛋白在生物體內(nèi)與其他蛋白協(xié)同作用，使核糖體發(fā)揮正常的生理功能。所有的核糖體蛋白構(gòu)成了一個(gè)獨(dú)立的蛋白家族，即核糖體蛋白家族。

核糖體蛋白S19為核糖體小亞基的組成成分，在古細(xì)菌及真核生物的核糖體裝配中，均含有這一核糖體蛋白。所有不同來(lái)源的S19蛋白均含有高度的序列相似性。這些蛋白均為核糖體蛋白家族的成員，且均由143-155個(gè)氨基酸殘基組成。研究發(fā)現(xiàn)，核糖體蛋白S19在核糖體裝配過(guò)程中直接與rRNA的特異區(qū)域結(jié)合，其在生物體染色質(zhì)消減過(guò)程中起重要調(diào)節(jié)作用。染色質(zhì)消減是生物體對(duì)不同基因表達(dá)的一種調(diào)節(jié)方式，通過(guò)染色質(zhì)消減來(lái)調(diào)節(jié)體細(xì)胞與胚胎細(xì)胞中的DNA的不同含量及一些基因的表達(dá)[Etter?A.，Aboutanos?M.et?al.，1991，Proc?Natl?AcadSci?U.S.A.，88：1593-1596]。因而，該蛋白在生物體遺傳信息的表達(dá)過(guò)程中起著重要的作用。

所有的核糖體S19蛋白的中心區(qū)域均含有如下所示的一致性序列片段：

G-G-G-X(2)-[GSA]-Q-X(2)-[SA]-X(3)-[GSA]-X-[GSTAV]-[KR]-[GSAL]-[LIF]；該序列片段是蛋白與rRNA及其他核糖體組成蛋白結(jié)合，共同維持核糖體活性構(gòu)象的中心區(qū)域并發(fā)揮正常生理學(xué)功能的中心區(qū)域。該片段的突變將導(dǎo)致核糖體S19蛋白的表達(dá)異常，從而不能正常地調(diào)控遺傳信息的表達(dá)，即影響生物體內(nèi)各種相關(guān)的代謝途徑的正常進(jìn)行。該蛋白的表達(dá)異常通常會(huì)導(dǎo)致蛋白翻譯水平的表達(dá)調(diào)控異常，從而引發(fā)各種相關(guān)的代謝紊亂癥、免疫系統(tǒng)疾病、各種腫瘤及癌癥的發(fā)生等。

1992年，Kondoh等人從人中又克隆得到了一新的核糖體蛋白S19。該蛋白亦含有如上所示的核糖體蛋白S19保守的序列片段。其在生物體內(nèi)亦與rRNA及其他核糖體組成蛋白結(jié)合，共同維持核糖體活性構(gòu)象的中心區(qū)域并發(fā)揮正常生理學(xué)功能。其在體內(nèi)調(diào)控著相關(guān)組織蛋白的轉(zhuǎn)錄與表達(dá)，其突變或表達(dá)異常將導(dǎo)致相關(guān)組織發(fā)育及代謝的異常，進(jìn)而引發(fā)各種相關(guān)的疾病[Kondoh?N.，SchweinfestC.W.et?al.，1992，Cancer?Res，52(4)：791-796]。研究發(fā)現(xiàn)，該蛋白在結(jié)腸癌細(xì)胞中高表達(dá)，其可能與生物體免疫系統(tǒng)疾病及相關(guān)組織的腫瘤及癌癥等的發(fā)生密切相關(guān)。該蛋白還可用于診斷及治療上述各種相關(guān)的疾病。

通過(guò)基因芯片的分析發(fā)現(xiàn)，在正常腦、肝癌、肌肉、胎腦、胎腎，胎肺、胎肝、甲狀腺、胸腺、成人肝、肺、膠質(zhì)瘤中，本發(fā)明的多肽的表達(dá)譜與核糖體蛋白S19的表達(dá)譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發(fā)明被命名為核糖體蛋白S19-35.53。

由于如上所述核糖體蛋白S19-35.53蛋白在調(diào)節(jié)細(xì)胞分裂和胚胎發(fā)育等機(jī)體重要功能中起重要作用，而且相信這些調(diào)節(jié)過(guò)程中涉及大量的蛋白，因而本領(lǐng)域中一直需要鑒定更多參與這些過(guò)程的核糖體蛋白S19-35.53蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新核糖體蛋白S19-35.53蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態(tài)下的作用提供了基礎(chǔ)。這種蛋白可能構(gòu)成開(kāi)發(fā)疾1病診斷和/或治療藥的基礎(chǔ)，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發(fā)明的一個(gè)目的是提供分離的新的多肽——核糖體蛋白S19-35.53以及其片段、類似物和衍生物。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供含有編碼核糖體蛋白S19-35.53的多核苷酸的重組載體。