[發(fā)明專利]一種新的多肽——高爾基體運輸?shù)鞍祝?7.61和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 01105094.2
• 申請日: 2001-01-05
• 公開（公告）號: CN1363604A
• 公開（公告）日: 2002-08-14
• 發(fā)明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發(fā)有限公司
• 主分類號: C07K14/47
• 分類號: C07K14/47;C07K16/18;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C07H21/00;C12P21/02;G01N33/68;C12Q1/68;A61K38/17;A61K31/7088;A61P35/00;A61P7/00;A61P31/18;A61P31/00;A61P37/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發(fā)明屬于生物技術領域，具體地說，本發(fā)明描述了一種新的多肽——人gamma-cop蛋白-27.61(高爾基體運輸?shù)鞍?，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發(fā)明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

內(nèi)質(zhì)網(wǎng)里合成蛋白質(zhì)是通過高爾基體運載小泡運輸至血漿膜表面的(Rothman，J.et?al.，1992，Natrure，355，409-415)。高爾基運載小泡來源于帶有細胞溶膠和ATP的高爾基膜孵化(Orci，L.et?Al.，1986，Cell，46，171-184)。這些運載小泡就叫COPI-包被小泡，它們的直徑一致大約為75納米并且包含一個有細毛的蛋白質(zhì)外被。其外被蛋白包括外被體和ADP-核糖基化因子兩部分(Serafini，T.etal.，1991，Nature，349，215-220)。外被體是一個蛋白質(zhì)復合體，由7個亞基組成，分別是α、β、β、γ、δ、ε，ζ-COP。外被體以可溶的形式存在于細胞質(zhì)中，當COPI包被小泡形成時，外被體就聚集到高爾基膜上(Palmer，D.etal.，1993，J.Biol.Chem.268，12083-12089)。哺乳動物和酵母細胞的外被體在體內(nèi)結合一些融合蛋白，這些融合蛋白包含dilysine基元，該基元是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜蛋白在細胞質(zhì)中的典型尾部(Cosson，P.et?al.，1994，Science，263，1629-1631)。該KKXX基元位于C末端，作為膜蛋白從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)到后內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的運輸信號G(Gaynor，E.C.etal.，1994，Cell?Biol.127，653-655)。????

COPI包被小泡所包被的膜蛋白是P23和P24家族。P24家族蛋白質(zhì)包括一個大的luminal結構域，一個單獨的轉膜結構域和一個短的胞質(zhì)尾巴。COPI包被小泡的外被體能與所有的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)提取基元以及P24家族成員的二苯胺基元結合(Sohn，K.etal.，1996，J.Cell?Biol，135，1239-1248)。這表明包被復合體參與了蛋白質(zhì)的逆行轉運(Cosson，P.et?al.，1994，Science，263，1629-1631)。在外被體與P23結合過程中，γ-COP是與P23特異性結合的外被體亞基。并且，Wbp1p和P23胞質(zhì)尾巴分享一個共同的γ-COP結合位點。上文所提的融合蛋白中的KKXX基元也是和γ-COP結合的。

γ-COP是唯一的外被體標記蛋白，不僅是因為它與P23多肽結合，還因為它在瓊脂糖顆粒表面和膜的細胞質(zhì)結構域模擬突起中所表現(xiàn)的獨立方式。γ-COP基因編碼一個874個氨基酸的蛋白質(zhì)，分子量為97,385。γ-COP可能功能就是與KKXX基元結合調(diào)節(jié)膜蛋白到COPI包被小泡的逆行性分裝。

通過基因芯片的分析發(fā)現(xiàn)，在正常腦、肝癌、肌肉、胎腦、胎腎，胎肺、胎肝、甲狀腺、胸腺、成人肝、肺、膠質(zhì)瘤中，本發(fā)明的多肽的表達譜與人gamma-cop蛋白的表達譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發(fā)明被命名為人gamma-cop蛋白27.61。

由于如上所述人gamma-cop蛋白27.61蛋白在調(diào)節(jié)細胞分裂和胚胎發(fā)育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調(diào)節(jié)過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人gamma-cop蛋白27.61蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人gamma-cop蛋白27.61蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態(tài)下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發(fā)疾1病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發(fā)明的一個目的是提供分離的新的多肽——人gamma-cop蛋白27.61以及其片段、類似物和衍生物。

本發(fā)明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發(fā)明的另一個目的是提供含有編碼人gamma-cop蛋白27.61的多核苷酸的重組載體。

本發(fā)明的另一個目的是提供含有編碼人gamma-cop蛋白27.61的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發(fā)明的另一個目的是提供生產(chǎn)人gamma-cop蛋白27.61的方法。

本發(fā)明的另一個目的是提供針對本發(fā)明的多肽——人gamma-cop蛋白27.61的抗體。

本發(fā)明的另一個目的是提供了針對本發(fā)明多肽——人gamma-cop蛋白27.61的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發(fā)明的另一個目的是提供診斷治療與人gamma-cop蛋白27.61異常相關的疾病的方法。