[發明專利]一種新的多肽——人含位點特異的重組酶特征性序列片段的蛋白12.63和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 01105072.1
• 申請日: 2001-01-05
• 公開（公告）號: CN1363589A
• 公開（公告）日: 2002-08-14
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C07K14/47
• 分類號: C07K14/47;C07K16/18;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C07H21/00;C12P21/02;G01N33/68;C12Q1/68;A61K38/17;A61K31/7088;A61P35/00;A61P7/00;A61P31/18;A61P31/00;A61P37/02
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本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——人含位點特異的重組酶特征性序列片段的蛋白12.63，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

位點特異的重組酶在原核生物DNA重組過程中起重要的調節作用。DNA重組是遺傳物質重組、進化的重要步驟。人們已克隆得到兩種不同類型的重組酶：一種在DNA片段的逆轉重組過程中起調節作用；另一種在DNA片段切除及重組過程中起調節作用。DNA位點特異的重組只需單鏈的轉換，而不需DNA的合成或高能量協同因子的共同參與。

目前，人們已得到并研究了兩種無相關性的重組酶家族，一種為周期整合重組酶家族，該家族的成員多為細菌、酵母質粒酶等。另一種為溶解酶家族，該酶家族的成員均含有高度保守的結構特征，其N末端為催化活性及二聚作用結構域，含有高度保守的絲氨酸殘基，參與DNA的結合及作用；而其C末端為保守的螺旋-轉角-螺旋DNA結合結構域。該蛋白家族的成員在生物體內參與多種重要的DNA重組過程。

進一步的研究發現，溶解酶家族的成員均由180至200個氨基酸殘基組成。且該蛋白家族成員的蛋白序列中均含有兩個高度保守的特征性序列片段，第一個保守的序列片段為蛋白N末端區域，其中含有一保守的絲氨酸殘基，參與蛋白與DNA的共價結合；第二個保守的特征性序列片段約在絲氨酸活性作用位點的上游50個氨基酸殘基位點。該兩個保守的特征性序列片段如下所示：序列片段1：Y-[LIVAC]-R-[VA]-S-[ST]-X(2)-Q；序列片段2：G-[DE]-X(2)-[LIVM]-X(3)-[LIVM]-[DT]-R-[LIVM]-[GSA]；其中，序列片段1中的S即為絲氨酸活性中心位點。該兩個序列片段的突變或表達異常將直接蛋白在體內的作用異常，進而影響相關的DNA遺傳物質在體內的重組及表達。

由上可知，DNA重組酶在生物體內可分為兩種不同的蛋白家族，其中溶解酶家族的成員在生物體內的分布比較廣泛，其參與調控多種重要的DNA重組及進化過程，該蛋白的突變或表達異常將直接影響遺傳物質在體內的重組及表達。該蛋白家族的成員通常與生物體內多種發育紊亂性疾病、遺傳性疾病及相關組織的腫瘤及癌癥等疾病的發生密切相關。

通過基因芯片的分析發現，在正常腦、肝癌、肌肉、胎腦、胎腎，胎肺、胎肝、甲狀腺、胸腺、成人肝、肺、膠質瘤中，本發明的多肽的表達譜與人含位點特異的重組酶特征性序列片段的蛋白的表達譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發明被命名為人含位點特異的重組酶特征性序列片段的蛋白12.63。

由于如上所述人含位點特異的重組酶特征性序列片段的蛋白12.63蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人含位點特異的重組酶特征性序列片段的蛋白12.63蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人含位點特異的重組酶特征性序列片段的蛋白12.63蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾1病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽——人含位點特異的重組酶特征性序列片段的蛋白12.63以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人含位點特異的重組酶特征性序列片段的蛋白12.63的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人含位點特異的重組酶特征性序列片段的蛋白12.63的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產人含位點特異的重組酶特征性序列片段的蛋白12.63的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽——人含位點特異的重組酶特征性序列片段的蛋白12.63的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽——人含位點特異的重組酶特征性序列片段的蛋白12.63的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與人含位點特異的重組酶特征性序列片段的蛋白12.63異常相關的疾病的方法。

本發明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO：2氨基酸序列的多肽。

本發明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：