[發明專利]家畜肉質、生長、胴體與生殖特性的遺傳標志

無效

• 申請號: 00810324.0
• 申請日: 2000-05-15
• 公開（公告）號: CN1361788A
• 公開（公告）日: 2002-07-31
• 發明（設計）人: D·L·格雷格爾
• 申請（專利權）人: 賓夕法尼亞州研究基金會
• 主分類號: C07H21/04
• 分類號: C07H21/04;C12Q1/68
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司
• 代理人: 張廣育,姜建成

1.一種篩選測試對象的方法，用以鑒定那些很可能具有較好的生長、發育、生殖和胴體特征，如增重率，胴體長度，或窩仔大小的對象，包括：從測試對象取得遺傳材料的樣品，測定CYP11a1基因中的多態性的存在，而后者是與增重率、胴體長度和窩仔大小有關的。

2.權利要求1的方法，其中所述測定步驟選自以下一組方法：限制性片段長度多態性(RFLP)分析，異源雙鏈分析，單鏈構象多態性(SSCP)，變性梯度凝膠電泳(DGGE)和溫度梯度凝膠電泳(TGGE)。

3.權利要求1的方法，其中所述測定存在所述多態性的步驟包括以下步驟：用一種能在至少一個位置上切割CYP11a1基因的限制性內切酶消化該遺傳材料；分離消化所得片段；檢測該片段生成的限制性圖型；將該圖型與用該限制酶所得的CYP11a1基因的第二種圖型進行比較，此處所述第二種限制性圖型是與增重率增加、胴體長度增加和窩仔大小增加相關聯的。

4.權利要求1的方法，其中所述測試對象選自豬、乳牛和雞。

5.權利要求3的方法，其中所述限制性酶是SphI，所述測試對象是豬。

6.權利要求3的方法，其中所述的分離是凝膠電泳。

7.權利要求3的方法，其中所述比較限制性圖型的步驟包括根據大小來鑒定特定片段，以及比較所述片段的大小。

8.權利要求5的方法，還包括此步驟：在消化步驟之前，擴增豬CYP11a1基因的量，或其含有該多態性的部分的量。

9.權利要求3的方法，其中所述限制性位點位于CYP11a1基因的非翻譯區。

10.權利要求7的方法，其中所述的擴增包括以下步驟：選擇能擴增豬CYP11a1基因中含有多態性限制位點的一個區域的正向和反向序列引物。

11.權利要求10的方法，其中所述正向和反向引物長度在10～50核苷酸之間，并選自SEQ?ID?NO：1。

12.權利要求10的方法，其中所述正向引物是SEQ?ID?NO：2，所述反向引物是SEQ?ID?NO：3。

13.權利要求6的方法，其中所述檢測片段大小的步驟包括：在有已知大小的對照DNA片段的存在下用凝膠電泳分離所述片段；將已分離開的片段與探針接觸，探針與片段雜交形成探針-片段復合物；通過檢測探針片段的存在確定被分離片段的大小。

14.一種鑒定關于豬生長率、胴體長度、窩仔大小或豬異味的遺傳學標志的方法，包括以下步驟：繁殖同一品種或雜交品種或衍生自相似遺傳譜系的雄性和雌性豬；確定生長率、胴體長度、子代數量、或豬異味的存在；測定每頭豬CYP11a1基因中多態性的存在；找出生長率、胴體長度、子代數量或豬異味存在與所述多態性之間的關聯，由此鑒定一種關于這些特性的多態性。

15.權利要求14的方法，進一步包括：根據所述標志選擇預測為具有較好生長率、較長胴體、窩仔大小增加、或低豬異味的豬進行飼養的步驟。

16.權利要求14的方法，其中所述分析包括用限制性酶Sphl消化PCR擴增的DNA。

17.權利要求12的方法，其中與生長率、胴體長度、窩仔大小或豬異味相關聯的多態性是用正向和反向引物檢測的，這些引物包括SEQNOS：2和3中至少4個連續堿基。

18.一個評價豬DNA樣品的試劑盒，包括：在一容器中，一種鑒定豬CYP11a1基因多態性的試劑。

19.權利要求18的試劑盒，其中的試劑是一種擴增豬CYP11a1基因或其片段的引物。

20.權利要求18的試劑盒，還包括一種DNA聚合酶，一種在豬CYP11a1基因的至少一個位置上進行切割的限制性酶；以及能擴增豬CYP11a1基因中含有一多態位點的區域的正向和反向引物。

21.用于測定豬CYP11a1基因中存在多態性Sphl位點的一種引物，其中該引物包含一個來自SEQ?ID?NO：2和SEQ?ID?NO：3的一個序列。

22.與豬的生長率、胴體長度、窩仔大小及豬異味有關聯的一種遺傳標志，該標志包含豬CYP11a1基因中的多態性。