[發明專利]通過缺失或消除非必需基因而減毒的重組副流感病毒疫苗

無效

• 申請號: 00810118.3
• 申請日: 2000-07-06
• 公開（公告）號: CN1370237A
• 公開（公告）日: 2002-09-18
• 發明（設計）人: 安娜·P·德賓;彼得·L·柯林斯;布賴恩·墨菲
• 申請（專利權）人: 美國政府健康及人類服務部
• 主分類號: C12N15/45
• 分類號: C12N15/45;C07K14/115;C12N7/04;A61K39/155;C12N15/11
• 代理公司: 中原信達知識產權代理有限責任公司
• 代理人: 丁業平,王維玉

1.一種分離的感染性重組副流感病毒(PIV)，包含一個PIV基因組或反基因組、一個核殼蛋白(N)、一個磷蛋白(P)和一個大聚合酶蛋白(L)，其中在所述基因組和反基因組中引入了一種改變，這種改變包含一個或多個C、D或V?ORF的部分或完全缺失，或使一個或多個C、D或V?ORF的表達降低或消除的一個或多個核苷酸變化。

2.權利要求1的重組PIV，其中所述一個或多個C、D或V?ORF的表達因引入的一個或多個終止密碼子而降低或消除。

3.權利要求1的重組PIV，其中所述一個或多個C、D或V?ORF的表達因RNA編輯位點的突變或改變起始密碼子特定氨基酸的突變而降低或消除。

4.權利要求1的重組PIV，其中所述一個或多個C、D或V?ORF的表達因引入的移碼突變而降低或消除。

5.權利要求1的重組PIV，其中所述一個或多個C、D或V?ORF被整體或部分地缺失。

6.權利要求1的重組PIV，其中在基因組或反基因組中引入的改變包括C?ORF部分或全部的缺失或使C?ORF表達降低或消除的一個或多個核苷酸改變。

7.權利要求6的重組PIV，其中C?ORF的表達因引入的一個或多個終止密碼子而降低或消除。

8.權利要求7的重組PIV，其中因所述基因組或反基因組在第1795處的一個核苷酸變化，C?ORF起始密碼子被改為蘇氨酸密碼子，并且通過改變在1813和1869處的核苷酸而引入了兩個終止密碼子。

9.權利要求6的重組PIV，其是rC-KO。

10.權利要求1的重組PIV，其中在基因組或反基因組中引入的改變包括D?ORF部分或全部的缺失或使D?ORF表達降低或消除的一個或多個核苷酸改變。

11.權利要求9的重組PIV，其中D?ORF的表達因引入的一個或多個終止密碼子而降低或消除。

12.權利要求10的重組PIV，其中通過改變在所述反基因組的第2692、2695、2698處的核苷酸而引入了三個終止密碼子。

13.權利要求9的重組PIV，其是rD-KO。

14.權利要求1的重組PIV，其中在基因組或反基因組中引入的改變包括V?ORF部分或全部的缺失或使V?ORF表達降低或消除的一個或多個核苷酸改變。

15.權利要求12的重組PIV，其中V?ORF的表達因引入的一個或多個終止密碼子而降低或消除。

16.權利要求13的重組PIV，其中通過改變在所述反基因組第2845和2854處的核苷酸而引入了兩個終止密碼子。

17.權利要求13的重組PIV，其是rV-KO。

18.權利要求1的重組PIV，其中在基因組或反基因組中引入的改變包括所述C、D和V?ORF中至少兩個的部分或全部的缺失，或使所述C、D和V?ORF中的至少兩個的表達降低或消除的一個或多個核苷酸改變。

19.權利要求18的重組PIV，其中D和V?ORF都被部分或全部地缺失，或發生了使二者表達降低或消除的一個或多個核苷酸改變的修飾。

20.權利要求18的重組PIV，其是rDV-KO。

21.權利要求1的重組PIV，其中在基因組或反基因組中的改變導致了重組PIV中一個或多個所需的表型變化，其選自：(i)在細胞培養中減毒，(ii)在哺乳動物宿主上和/或下呼吸道中減毒，(iii)病毒噬菌斑大小的改變，(iv)細胞病理學效果改變，以及(v)免疫原性改變。

22.權利要求21的重組PIV，其中病毒在細胞培養中的生長比相應野生型或突變親本PIV株的生長降低約5-10倍或更多。

23.權利要求21的重組PIV，其中病毒在上、下呼吸道中的生長比相應野生型或突變親本PIV株的生長降低約10-100倍或更多。