[發明專利]基因治療劑

無效

• 申請號: 00805467.3
• 申請日: 2000-03-14
• 公開（公告）號: CN1345248A
• 公開（公告）日: 2002-04-17
• 發明（設計）人: 加藤郁之進;淺田起代蔵;上野充博;橋野仁一;吉岡廣文;田中啟二
• 申請（專利權）人: 寶酒造株式會社
• 主分類號: A61K48/00
• 分類號: A61K48/00;//A61K31/70;A61K35/12;A61K35/28;A61K35/30;A61K38/02A61K38/16;A61K38/19;A61K38/22;A61K38/43;A61K39/395
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司
• 代理人: 張廣育,姜建成

技術領域

本發明涉及用于導彈基因治療(missile?gene?therapy)的組合物和方法，它可用于治療需要進行基因治療的疾病和用于體內將基因選擇性轉移到靶細胞中。

背景技術

迄今在世界上已進行了大約3000例基因治療。有關基因治療的最大的技術問題是：將治療基因轉移到靶細胞、特別是轉移到造血干細胞中的效率非常低。近來，基因轉移效率已通過使用纖連蛋白片段CH-296(Takara?Shuzo；RetroNectin)的重組蛋白得到顯著提高，并由此使基因治療具有了實用性(自然醫學2：876-882(1996))。重組RetroNectin分子可以與具有摻入的治療基因的逆轉錄病毒和靶細胞結合，使得它們變得彼此相鄰，從而大大提高了基因轉移效率。據說最困難的是將基因轉移到人造血干細胞中。然而，即使是對于人造血干細胞，使用RetroNectin也已使治療基因的轉移效率達到了約90％。RetroNectin是一種單多肽，其中特異性結合造血干細胞的肽與特異性結合具有摻入的治療基因的逆轉錄病毒載體的肽連接。本發明人已證明即使將RetroNectin中的這兩部分彼此分離并混合成混合物，它們也顯示出與原始RetroNectin分子相同的活性，并將這種方法稱之為雞尾酒基因轉移法(參見WO97/18318)。

使用RetroNectin將基因轉移到造血干細胞中的方法是一種劃時代的方法，它提高了將基因轉移到造血干細胞中的效率。該方法包括在體外將基因轉移到造血干細胞中和將具有該轉移基因的造血干細胞復原到活體中。因此可以認為，包含這些步驟的方法太復雜了，以致在有些情況下無法將其用于基因治療。

現在，需要提供一種可應付將要用于基因治療的靶細胞的多樣性的靶細胞特異性基因轉移法。

現已進行了嘗試，想通過加入對細胞具有特異性親和力的配體來賦予靶細胞對非病毒載體(例如，使用聚賴氨酸或類似物質作為保留核酸的媒介物的載體)的指向性。但是，利用這種方法轉移的基因不能穩定地保持在細胞中。各自表達帶有對靶細胞具有親和力的配體的病毒被膜的融合蛋白的病毒載體是已知的。然而，由于被膜固有的感染功能和配體固有的結合功能二者或二者之一因作為融合體表達而遭到破壞，使得在許多情況下沒能實現預期的導向作用。另外，為了表達融合被膜，必需復雜地構建用于每種類型的靶細胞的包裝細胞。此外，為了建立可提供高效價病毒載體懸液的包裝細胞系，需要將大量時間花費在制備實驗上，以確認沒有出現具有復制能力的逆轉錄病毒(RCR)，等等。

如上所述，為了有效地將有價值的基因特異性地轉移到靶細胞中，人們一直希望能解決現有技術中仍然存在的各種問題。

發明目的

本發明的主要目的是提供一種用于包括在體內轉移基因的基因治療的治療組合物，和提供一種方便的基因治療方法，該方法包括使用所述治療組合物在體內將基因特異性地轉移到靶細胞中。

發明概述

本發明概述如下。本發明的第一個方面涉及用于治療對基因治療敏感的疾病的基因治療用的組合物，它含有作為活性成分的有效量的功能物質，該功能物質具有對包含用于基因治療的基因的病毒具親和力的功能和對需要進行基因轉移的靶細胞具特異性親和力的功能。

第一個方面的組合物可以包含有效量的含有用于基因治療的基因的病毒。例如，該病毒可以與功能物質混合包含其中。另一方面，該病毒可以包含其中使得它能與功能物質混合。

對于第一個方面的組合物，功能物質的對病毒具親和力的功能沒有具體的限制，并可通過由選自下列成員的功能物質產生的一種功能舉例說明：抗病毒抗體、纖連蛋白的肝素-II結合結構域、成纖維細胞生長因子、膠原和聚賴氨酸以及其功能等價物。

對于第一個方面的組合物，功能物質的對靶細胞具特異性親和力的功能沒有具體的限制，并可通過由選自下列成員的功能物質產生的一種功能舉例說明：各自對靶細胞具有親和力的蛋白質、激素、細胞因子、抗靶細胞抗體、糖鏈、糖類和細胞。

本發明的第二個方面涉及用于治療對基因治療敏感的疾病的基因治療用的組合物，它含有作為活性成分的、有效量的、對含有用于基因治療的基因的病毒具有親和力的功能物質和有效量的、對需要進行基因轉移的靶細胞具有特異性親和力的另一種功能物質。

第二個方面的組合物可以包含有效量的含有用于基因治療的基因的病毒。例如，病毒可以是與對該病毒具有親和力的功能物質混合包含其中的。另一方面，病毒可以包含其中使得它能隨著使用而與對該病毒具有親和力的功能物質混合。