[發(fā)明專利]改善植物的農(nóng)藝和營養(yǎng)價值的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 00804609.3
• 申請日: 2000-03-03
• 公開（公告）號: CN1347454A
• 公開（公告）日: 2002-05-01
• 發(fā)明（設(shè)計）人: P·貝耶;I·波特賴庫斯
• 申請（專利權(quán)）人: 格林諾瓦森植物生物技術(shù)股份有限公司
• 主分類號: C12N15/52
• 分類號: C12N15/52;C12N15/53;C12N15/82;C12N5/10;A01H5/00
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司
• 代理人: 張廣育,鐘守期

1.一種分離的DNA分子，包括具有一個或多個表達(dá)框的核苷酸序列，所述表達(dá)框能夠指導(dǎo)選自下列一組的類胡蘿卜素生物合成途徑所特有的一種或多種酶產(chǎn)生：-源于植物、真菌、或細(xì)菌的八氫番茄紅素合成酶，

-源于植物、真菌、或細(xì)菌的八氫番茄紅素脫飽和酶，

-源于植物的ζ-胡蘿卜素脫飽和酶，和

-源于植物、真菌、或細(xì)菌的番茄紅素環(huán)化酶，

其前提是，排除了僅能指導(dǎo)八氫番茄紅素合成酶產(chǎn)生的表達(dá)框。

2.如權(quán)利要求1的DNA分子，其中，所述表達(dá)框包括一個或多個編碼植物、真菌或細(xì)菌八氫番茄紅素合成酶，植物、真菌或細(xì)菌八氫番茄紅素脫飽和酶，植物ζ-胡蘿卜素脫飽和酶，或植物、真菌、或細(xì)菌的番茄紅素環(huán)化酶的基因或cDNA，所述基因各自可操作地與合適的組成型、誘導(dǎo)型、或組織專一型啟動子連接，使其能在植物細(xì)胞、種子、組織或全植株中表達(dá)，其前提是，排除了僅包括編碼八氫番茄紅素合成酶的基因或cDNA的表達(dá)框。

3.如權(quán)利要求1或2的DNA分子，還包括至少一個可操作地連接于能使其在植物細(xì)胞、種子、組織或全植株中表達(dá)的組成型、誘導(dǎo)型或組織專一型啟動子上的選擇標(biāo)記基因或cDNA。

4.如權(quán)利要求1-3中任一項的DNA分子，其中，所述編碼八氫番茄紅素合成酶的核苷酸序列源于植物，優(yōu)選在組織專一型啟動子的控制下表達(dá)。

5.如權(quán)利要求1-4中任一項的DNA分子，其中，所述編碼八氫番茄紅素脫氫酶的核苷酸序列源于細(xì)菌并且與合適的質(zhì)體轉(zhuǎn)運肽編碼序列融合，這兩個序列優(yōu)選在組織專一型或組成型啟動子的控制下表達(dá)。

6.如權(quán)利要求1-5中任一項的DNA分子，其中，所述編碼源于植物的番茄紅素環(huán)化酶的核苷酸序列優(yōu)選是在組織專一型或組成型啟動子的控制下表達(dá)。

7.如權(quán)利要求2-6中任一項的DNA分子，其中，所述選擇標(biāo)記基因或cDNA是受組成型啟動子控制的潮霉素磷酸轉(zhuǎn)移酶。

8.如權(quán)利要求1-7中任一項的DNA分子，其中，所述核苷酸序列包括編碼八氫番茄紅素合成酶和細(xì)菌或真菌八氫番茄紅素脫飽和酶的功能性表達(dá)框。

9.如權(quán)利要求1-7中任一項的DNA分子，其中，所述核苷酸序列包括編碼番茄紅素環(huán)化酶的功能性表達(dá)框。

10.如權(quán)利要求5或8的DNA分子，其中，所述質(zhì)體轉(zhuǎn)運肽序列源于豌豆Rubisco小亞基(tp)。

11.一種包括一個或多個權(quán)利要求1-10中任一項所述的DNA分子的質(zhì)粒或載體系統(tǒng)。

12.如權(quán)利要求11的質(zhì)?；蜉d體系統(tǒng)，它源于根癌農(nóng)桿菌。

13.含有權(quán)利要求1-10中任一項所述DNA分子的轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞、種子、組織或全植株。

14.如權(quán)利要求13的轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞、種子、組織或全植株，選自下列一組：真核藻類，有胚植物，包括苔蘚植物、蕨類植物、和種子植物，如裸子植物和被子植物，后者包括Magnoliopsida，Rosopsida、Liliopsida(單子葉植物)。

15.如權(quán)利要求14的轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞、種子、組織或全植株，選自下列一組：谷類種子，優(yōu)選水稻、小麥、大麥、燕麥、莧、亞麻、黑小麥、黑麥、和玉米；油用種子，優(yōu)選蕓薹種子、棉籽、大豆、紅花、向日葵、椰子果、和棕櫚；其他食用種子或具有可食用部分的種子，選自南瓜、西葫蘆、芝麻、罌粟、葡萄、綠豆、花生、豌豆、菜豆、蘿卜、苜蓿、可可、咖啡、大麻；樹木堅果，優(yōu)選胡桃、杏、大胡桃、鷹嘴豆；馬鈴薯、胡蘿卜、甘薯、番茄、辣椒、木薯、柳樹、橡樹、榆樹、楓樹、蘋果、香蕉；以及觀賞花卉，優(yōu)選百合、蘭花、蘆葦、薔薇、毛茛、矮牽牛、草夾竹桃、紫羅蘭、和向日葵。

16.一種轉(zhuǎn)化植物細(xì)胞、種子、組織或全植株以便產(chǎn)生能夠表達(dá)產(chǎn)生感興趣的胡蘿卜素或葉黃素所必需的類胡蘿卜素生物合成途徑的所有酶的轉(zhuǎn)化體的方法，包括用一種或多種如權(quán)利要求1-10中任一項所述DNA分子或用權(quán)利要求1或11所述的質(zhì)粒或載體系統(tǒng)轉(zhuǎn)化所述植物細(xì)胞、種子、組織或全植株。

17.如權(quán)利要求16的方法，其中，被選擇用于轉(zhuǎn)化的宿主植物細(xì)胞、種子或組織正常情況下是不含類胡蘿卜素的。