[發明專利]L－山梨糖的制備方法

無效

• 申請號: 00803945.3
• 申請日: 2000-02-18
• 公開（公告）號: CN1346401A
• 公開（公告）日: 2002-04-24
• 發明（設計）人: A·M·雅各布森;K·H·尼爾森
• 申請（專利權）人: BASF公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P19/02;C12P7/60;C12P17/04;C12Q1/02;C12Q3/00
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司
• 代理人: 溫宏艷,鐘守期

1.一種高度耐受D-山梨醇的氧化葡糖桿菌菌種的細菌，它是通過在逐步增加的初始D-山梨醇濃度中培養低耐性氧化葡糖桿菌菌株，使該菌株逐漸適應培養基中較高的D-山梨醇濃度，使該低耐性的氧化葡糖桿菌菌株得到調理獲得的。

2.權利要求1的細菌，其中D-山梨醇濃度逐步從初始的約5-10％(重量)增加至最終濃度約25-38％(重量)。

3.前面權利要求任一項的細菌，其特征還在于它具有基本上穩定的L-山梨糖合成性能。

4.權利要求3的細菌，它是通過在較高山梨醇濃度下重復培養耐山梨醇的細菌，直到L-山梨糖形成結束獲得的。

5.權利要求1-4任一項的細菌，其中使用氧化葡糖桿菌NRRL-B72進行調理。

6.前面權利要求任一項的細菌，其中它

a)在有氧條件下將D-山梨醇轉化成L-山梨糖；

b)以單個、成對或短鏈非運動、革蘭氏陰性、不形成孢子的桿狀形式存在；和

c)在山梨醇-葡萄糖-酵母提取物-瓊脂培養基和山梨醇-玉米漿培養基中在pH3.5-6，溫度為25-40℃和D-山梨醇濃度到約38％(重量)下生長良好。

7.一種半連續發酵生產L-山梨糖的方法，該方法包含

a)將氧化葡糖桿菌菌種的細菌接種到含有D-山梨醇的第一個培養基中并培養它，直到該D-山梨醇轉化基本上結束；

b)轉化結束之后，將形成的L-山梨糖從大部分所得培養肉湯中分離出來；

c)將剩余量的培養肉湯以重量比1∶4-1∶8接種到第二個含D-山梨醇的培養基中并培養它，直到D-山梨醇轉化基本上結束；和

d)轉化結束之后，將形成的L-山梨糖從培養肉湯中分離出來；

每種情況下培養基接種之后的初始D-山梨醇濃度最高約38％(重量)。

8.權利要求7的方法，其中根據需要重復包括步驟a)-c)的發酵循環。

9.權利要求7和8任一項的方法，其中發酵溫度為約25-40℃。

10.權利要求7-9任一項的方法，其中將新接種的培養基的pH調整至約pH5-6，并且在發酵過程中降至不低于約pH3.5。

11.權利要求7-10任一項的方法，其中在供應約0.5-1.5升大氣/升培養基/分鐘的情況下進行發酵。

12.權利要求7-11任一項的方法，其中接種之后，將該培養基培養約15-30小時。

13.權利要求7-12任一項的方法，其中在使用的培養基中每kg培養基包含：

a)約100-300g?D-山梨醇

b)約4-5g玉米漿(50％干基)

c)約0.4-0.6g(NH₄)₂SO₄

d)約0.1-0.15g(NH₄)₂HPO₄

e)約0.06-0.1gMgSO₄.7H₂O

f)約0.5-0.9gCaCO₃

g)有效量的消泡劑。

14.權利要求7-13任一項的方法，其中使用權利要求1-6任一項所定義的細菌。

15.一種制備2-酮-L-古洛糖酸的方法，該方法包含

a)使用權利要求7-14任一項的方法通過發酵將D-山梨醇轉化成L-山梨糖，和

b)就地或中間分離之后將以這種方式制備的L-山梨糖以常規方式轉化成2-酮-L-古洛糖酸。

16.權利要求1-6任一項的細菌用于由D-山梨醇制備L-抗壞血酸的用途。

17.一種生產高度耐受D-山梨醇的細菌的方法，該方法包含將權利要求1-5任一項的氧化葡糖桿菌菌種的細菌進行調理。