[發明專利]人類成年星形膠質細胞,它們的制備及應用

無效

• 申請號: 00802570.3
• 申請日: 2000-01-05
• 公開（公告）號: CN1340098A
• 公開（公告）日: 2002-03-13
• 發明（設計）人: J－L·里戴特;J·瑪萊特
• 申請（專利權）人: 阿文蒂斯藥物股份有限公司
• 主分類號: C12N5/06
• 分類號: C12N5/06;C12N5/10;A61K48/00
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所
• 代理人: 黃革生

1.一種制備基本上純的星形膠質細胞群體的方法，該方法包括：

??a)將星形膠質細胞制備物導入到培養器皿中，

??b)在能使星形膠質細胞貼附到培養器皿上的條件下，孵育由步驟a)得到的星形膠質細胞，和

??c)由步驟a)的開始算起，在大約第48小時時，去除那些尚未貼附到培養器皿上的細胞。

2.根據權利要求1的方法，其中星形膠質細胞是人類星形膠質細胞。

3.根據權利要求2的方法，其中人類星形膠質細胞是人類成年星形膠質細胞。

4.根據權利要求1的方法，那里所述基本上純的星形膠質細胞群體基本上沒有小膠質細胞。

5.根據權利要求1的方法，其中星形膠質細胞是通過外科切除術從患者得到的原始星形膠質細胞。

6.根據權利要求1的方法，其中未貼壁的細胞是通過更換培養液從培養器皿內去除的。

7.根據權利要求1的方法，進一步包括一個導入核酸到星形膠質細胞內的步驟d)。

8.根據權利要求7的方法，其中核酸是通過病毒載體導入到星形膠質細胞內的。

9.根據權利要求8的方法，其中病毒載體選自腺病毒、皰疹病毒、AAV、反轉錄病毒和痘苗病毒。

10.根據權利要求9的方法，其中病毒載體是復制缺陷的腺病毒載體。

11.根據權利要求7的方法，其中核酸是通過磷酸鈣沉淀、脂質體介導的轉染、陽離子脂質轉染或脂多胺介導的轉染導入到星形膠質細胞內的。

12.根據權利要求7的方法，其中核酸編碼神經活性物質。

13.通過權利要求1的方法產生的基本上純的星形膠質細胞群體。

14.基本上純的星形膠質細胞群體。

15.根據權利要求14的星形膠質細胞群體，其中星形膠質細胞是人類星形膠質細胞。

16.根據權利要求15的星形膠質細胞群體，其中人類星形膠質細胞是人類成年星形膠質細胞。

17.根據權利要求16的星形膠質細胞群體，其中所述星形膠質細胞群體基本上沒有小膠質細胞。

18.根據權利要求14的星形膠質細胞群體，其中星形膠質細胞是通過外科切除術從患者得到的原始星形膠質細胞。

19.根據權利要求14的星形膠質細胞群體，進一步包含外源核酸。

20.根據權利要求19的星形膠質細胞群體，其中核酸是通過病毒載體導入到星形膠質細胞內的。

21.根據權利要求20的星形膠質細胞群體，其中病毒載體選自腺病毒、皰疹病毒、AAV、反轉錄病毒和痘苗病毒。

22.根據權利要求21的星形膠質細胞群體，其中病毒載體是復制缺陷的腺病毒載體。

23.根據權利要求19的星形膠質細胞群體，其中核酸是通過磷酸鈣沉淀、脂質體介導的轉染、陽離子脂質轉染或脂多胺介導的轉染導入到星形膠質細胞內的。

24.根據權利要求19的星形膠質細胞群體，其中核酸編碼神經活性物質。

25.根據權利要求19的星形膠質細胞群體，其中所述核酸是DNA或RNA。

26.根據權利要求25的星形膠質細胞群體，其中所述核酸是編碼蛋白質、多肽或肽的DNA。

27.根據權利要求26的星形膠質細胞群體，其中所述蛋白質、多肽或肽選自生長因子、神經營養因子和酶。

28.根據權利要求25的星形膠質細胞群體，其中所述核酸是編碼反義RNA或核酶的DNA。

29.根據權利要求24的星形膠質細胞群體，其中所述核酸可操作地與調節區相連。

30.根據權利要求29的星形膠質細胞群體，其中調節區包含可調節的啟動子、可誘導的啟動子、神經細胞特異性啟動子或病毒啟動子。