[發明專利]色譜定量測定裝置及其制備方法

有效

• 申請號: 00801474.4
• 申請日: 2000-06-21
• 公開（公告）號: CN1318150A
• 公開（公告）日: 2001-10-17
• 發明（設計）人: 高橋三枝;灘岡正剛;田中宏橋
• 申請（專利權）人: 松下電器產業株式會社
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543;G01N33/74
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所
• 代理人: 楊宏軍

技術區域

本發明涉及利用抗原抗體反應定量測定被測物質的色譜定量測定裝置及其制備方法，特別是具有不透液性片材的色譜定量測定裝置及其制備方法。

背景技術

以前，作為實施水質檢查、尿檢查等液體試樣的化學試驗或臨床試驗的方法，廣泛采用利用抗原抗體反應的免疫色譜法進行測定。一般，色譜法是指將混合物根據其構成成分進行分離的方法，由包括添加液體試樣的部分、保持有隨液體試樣浸透可以移動的標記試劑的部分、具有與流動的分析對象物特異性結合的物質與標記試劑發生結合反應的部分、吸收流動試樣的部分的試件構成。該色譜測定裝置的測定方法可以將液體試樣添加在試件上放置，經過一定時間后發生顯色反應引起顯色或變色，通過目視檢測方式進行判斷。

免疫色譜測定原理是利用抗原抗體反應的特異性，鑒定抗原或抗體的測定方法。其操作是將液體試樣添加到免疫色譜試件上，由液體試樣溶解的標記試劑向浸透方向展開，與液體試樣中的分析對象物能夠特異性結合的物質被固定，在測定區域發生顯色。另外，免疫色譜的分析結果是通過顯色反應進行判斷，因此是通過目視檢測方式進行記錄。也就是說，由于檢測結果的判斷非常容易，具有用途范圍廣的特色。

這種采用免疫色譜法的測定可以用于各種分析對象物的檢查。但是，對于分析對象物不僅需要定性檢測，而且需要定量解答時，有時雖然也可以采用這種測定方法，但只能得出半定量的結果。因此，期望提供一種能得到定量分析結果的手段。

為了改善這一問題，在特開平8-240591號報告中公開了免疫色譜試件。該免疫色譜試件的測定方法是添加試樣進行反應后，用檢測儀器測定顯色部分的吸收或反射等信號，確定試件上檢測出的顯色程度。此外，特開平8-334511號公報公開的免疫色譜試件的測定方法是使用圖象傳感器給顯色的免疫色譜試件攝像，對圖象轉換出的色調圖象進行解析處理，求出顯色程度進行定量測定。

但是，使用免疫色譜試件進行定量測定時，如特開平8-240591號或特開平8-334511號列舉的實施例那樣，由于其顯色反應伴有的顯色程度的強弱或濃淡，采用分別相應的檢測儀器進行定量測定。以前，一般的免疫色譜試件由于沒有機械控制，且不能人為控制，液體試樣的浸透速度會左右試件的浸透性。例如，由于液體試樣從試件的側面蒸發，測定區域流出的分析對象物的量不均一。另外，每次測定使用的各個免疫色譜試件有時添加的液體試樣量和標記試劑量并不是恒定的。因此，存在這些原因會導致一定時間后的定量測定值差異大的問題。

而且，免疫色譜試件是添加液體試樣后，經過一定時間后進行測定的，這種情況下有時浸透的標記試劑一起溶出，作為背景殘留在反應層上。如果該背景的值加在顯色程度上，則檢測儀器的測定包含了這種誤差。因此，免疫色譜試件難以在短時間內進行定量測定，另外流到反應層上的標記試劑殘留量并不是恒定的，每次測定或者每個使用的試件不同，導致這時顯色程度的讀數誤差較大。

由于以上問題，采用免疫色譜法定量測定的性能根據試件的規格和添加的液體試樣量的差異，或背景帶來的誤差，只不過是半定量。因此，為了更準確地進行測定，強烈希望提高試件的性能。

另外，使用以前的免疫色譜試件，測定全血或細菌溶液等含有細胞成分的液體試樣時，液體試樣的粘性、細胞成分的存在會使反應層載體出現堵塞。結果導致測定時間長，其間出現液體試樣的干燥等，造成反應的精度或定量性能差。因此，強烈需要即使在全血或細菌溶液等的測定中，也能簡便而容易地測定的免疫色譜定量測定裝置。

本發明的目的在于解決上述問題，提供一種色譜定量測定裝置及其制備方法，測定精度不受添加的液體試樣的性質影響，能夠準確讀取作為分析對象物的液體試樣與標記試劑反應結果的顯色程度，而且不受背景帶來的標記試劑殘留量的影響。

發明公開

本發明(權利要求1)涉及的色譜定量測定裝置具有不能潤濕的反應層載體支持體、該支持體上部形成的1至任意數量的部件構成的可以潤濕的層，該可以潤濕的層由添加液體試樣的部分、保持有可以移動的標記試劑的部分、能夠與具有與液體試樣中的分析對象物特異性結合的物質的標記試劑進行結合反應的部分以及吸收液體試樣的部分構成，其特征在于在該色譜定量測定裝置中，在除添加液體試樣的部分之外的表面和側面上以密合狀態設置不透液性片材。

這種結構的色譜定量測定裝置可以防止水分的蒸發，使液體試樣的浸透方向和浸透狀況均一，另外一定時間內流過的液體試樣與標記試劑以均一的濃度流出。