[發明專利]一種新的多肽——人琥珀酸脫氫酶11.66和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00135151.6
• 申請日: 2000-12-20
• 公開（公告）號: CN1360035A
• 公開（公告）日: 2002-07-24
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C12N9/04
• 分類號: C12N9/04;C12N15/53;C12N15/63;C07K16/40;C12Q1/32;C12Q1/68;A61K38/44
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• 代理人: 暫無信息

本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——人琥珀酸脫氫酶11.66，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

細菌中有兩種不同的膜結合的酶復合物，它們負責轉換延胡索酸以及琥珀酸：厭氧生長所需的延胡索酸還原酶(Frd)以及需氧生長所需的琥珀酸脫氫酶(Sdh)。兩種復合物都由兩種主要成分構成：一種由一個FAD-結合的黃素蛋白以及一個鐵硫蛋白構成的膜外成分；另一種是疏水成分，由一個膜錨定蛋白以及一個細胞色素B構成。

在真核生物線粒體中，琥珀酸脫氫酶(泛醌)是一種由兩個亞基構成的酶：一個FAD黃素蛋白以及一個鐵硫蛋白。黃素蛋白亞基是一種約為60至70Kd的蛋白，FAD共價結合于該蛋白位于N-端的一個組氨酸殘基(Blaut?M.，Whittaker?K.，ValdovinosA.，Ackrell?B.A.，Gunsalus?R.P.，Cecchini?G.，J.Biol.Chem.264：13599-13604(1989))。這個組氨酸殘基周圍的序列在從細菌到真核生物各物種的Frd以及Sdh中高度保守，可作為一個特征序列模板：R-[ST]-H-[ST]-x(2)-A-x-G-G(Birch-Machin?M.A.，Farnsworth?L.，Ackrell?B.A.，Cochran?B.，Jackson?S.，Bindoff?L.A.，Aitken?A.，Diamond?A.G.，Turnbull?D.M.，J.Biol.Chem.267：11553-11558(1992))。在真核生物中，琥珀酸脫氫酶參與各種代謝反應，例如三羧酸循環等。

本發明新的多肽含有上述的特征序列模板，且具有與琥珀酸脫氫酶家族成員相似的生物學功能，因而被認為是琥珀酸脫氫酶家族的新成員。該多肽及其激動劑，抑制劑，拮抗劑可用于診斷兼防治與琥珀酸脫氫酶所參與的代謝反應相關的疾病，例如癌癥，免疫性疾病以及由能量代謝功能障礙而引起的各種疾病例如骨骼肌與心肌疾病以及與中樞神經系統相關的綜合征。

由于如上所述人琥珀酸脫氫酶11.66蛋白在機體內重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人琥珀酸脫氫酶11.66蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人琥珀酸脫氫酶11.66蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽——人琥珀酸脫氫酶11.66以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人琥珀酸脫氫酶11.66的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人琥珀酸脫氫酶11.66的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產人琥珀酸脫氫酶11.66的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽——人琥珀酸脫氫酶11.66的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽——人琥珀酸脫氫酶11.66的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與人琥珀酸脫氫酶11.66異常相關的疾病的方法。

本發明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO：2氨基酸序列的多肽。

本發明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，該多核苷酸的序列是選自下組的一種：(a)具有SEQ?ID?NO：1中188-508位的序列；和(b)具有SEQ?ID?NO：1中1-1320位的序列。

本發明另外涉及一種含有本發明多核苷酸的載體，特別是表達載體；一種用該載體遺傳工程化的宿主細胞，包括轉化、轉導或轉染的宿主細胞；一種包括培養所述宿主細胞和回收表達產物的制備本發明多肽的方法。

本發明還涉及一種能與本發明多肽特異性結合的抗體。