[發明專利]編碼glk基因的新核苷酸序列

無效

• 申請號: 00134610.5
• 申請日: 2000-12-01
• 公開（公告）號: CN1305000A
• 公開（公告）日: 2001-07-25
• 發明（設計）人: 貝蒂娜·默克爾;瓦爾特·普費弗勒
• 申請（專利權）人: 德古薩－于爾斯股份公司
• 主分類號: C12N15/10
• 分類號: C12N15/10;C12N15/11;C12N15/31;C12N15/52;C12N15/63;C12N1/21;C12P13/04;C07H21/00
• 代理公司: 永新專利商標代理有限公司
• 代理人: 林曉紅

1、來自谷氨酸棒桿菌的分離的多核苷酸，其包括選自如下一組的多核苷酸序列：

a)與編碼含有SEQ?ID?NO:2的氨基酸序列的多肽的多核苷酸至少70％相同的多核苷酸；

b)編碼含有與SEQ?ID?NO:2的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

c)與a)或b)的多核苷酸互補的多核苷酸，以及

d)含有a)、b)或c)的多核苷酸序列的至少15個連續核苷酸的多核苷酸。

2、如權利要求1所述的多核苷酸，其中該多核苷酸是能在棒狀細菌中復制的優選重組的DNA。

3、如權利要求1所述的多核苷酸，其中該多核苷酸是RNA。

4、如權利要求2所述的能復制的DNA，含有

(ⅰ)如SEQ?ID?NO.1所示的核苷酸序列，或

(ⅱ)在遺傳密碼簡并范圍內相應于(ⅰ)序列的至少一個序列，或

(ⅲ)與互補于(ⅰ)或(ⅱ)序列的序列雜交的至少一個序列，和任選地

(ⅳ)(ⅰ)中有功能的中性有義突變。

5、如權利要求2所述的多核苷酸序列，其編碼含有SEQ?ID?NO:2的氨基酸序列的多肽。

6、含有權利要求1所述的多核苷酸序列的載體。

7、含有如權利要求6所述的載體的棒狀細菌。

8、經發酵生產L-氨基酸的方法，其中進行以下步驟：

a)發酵產生L-氨基酸的棒狀細菌，其中至少編碼葡糖激酶的基因是增強的，尤其是過表達的；

b)富集培養基或細菌細胞中L-氨基酸；及

c)分離L-氨基酸。

9、如權利要求8所述的方法，其中使用的細菌中所需L-氨基酸的生物合成途徑的其它基因被額外增強。

10、如權利要求8所述的方法，其中使用的細菌中，降低L-氨基酸生成的代謝途徑至少被部分關閉。

11、如權利要求8所述的方法，其中使用用質粒載體轉化的菌株，所述載體攜帶編碼葡糖激酶的基因的核苷酸序列。

12、如權利要求8-11的任一項方法，其中使用產生L-賴氨酸的棒狀細菌。

13、如權利要求9所述的方法，其中編碼二氫-2,6-吡啶二羧酸合酶的dapA基因是同時過表達的。

14、如權利要求9所述的方法，其中編碼反饋抗性天冬氨酸激酶的lysC基因是同時過表達的。

15、如權利要求9所述的方法，其中編碼甘油醛-3-磷酸脫氫酶的gap基因是同時過表達的。

16、如權利要求9所述的方法，其中編碼丙糖磷酸異構酶的tpi基因是同時過表達的。

17、如權利要求9所述的方法，其中編碼3-磷酸甘油酸激酶的pgk基因是同時過表達的。

18、如權利要求9所述的方法，其中編碼丙酮酸羧化酶的pyc基因是同時過表達的。

19、如權利要求9所述的方法，其中編碼蘋果酸醌氧化還原酶的mqo基因是同時過表達的。

20、如權利要求9所述的方法，其中編碼賴氨酸輸出蛋白的lysE基因是同時過表達的。

21、如權利要求10所述的方法，其中編碼葡糖-6-磷酸異構酶的pgi基因是同時弱化的。

22、如權利要求10所述的方法，其中編碼烯醇丙酮酸羧激酶的pck基因是同時弱化的。