[發明專利]同生培養法生產蘇云金桿菌

無效

• 申請號: 00134344.0
• 申請日: 2000-12-21
• 公開（公告）號: CN1360024A
• 公開（公告）日: 2002-07-24
• 發明（設計）人: 張忠澤;張成剛;劉陽;陳綱
• 申請（專利權）人: 張忠澤
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P7/60;C12P39/00;//;C12R107)
• 代理公司: 沈陽科苑專利代理有限責任公司
• 代理人: 許宗富

本發明涉及一種蘇云金桿菌生產的新技術，即用二種菌--蘇云金桿菌和氧化葡萄糖酸桿菌混合同生工藝，生產蘇云金桿菌。

蘇云金桿菌制劑是一類應用廣泛的生物殺蟲劑。自1938年面世以來需求量逐年上升，現世界上年銷售額已達10億美元。隨著現代無公害農業的發展，其需求量將會出現更大的增長。為促進該生物殺蟲劑的快速發展，人們曾對制約其發展的諸多問題進行了研究，其中一個關鍵是降低成本。多年來，通過菌種選育，培養方式和培養條件的改善，生產成本在逐年下降，但幅度不大。價格偏高一直是影響其快速發展的一主要障礙。

本發明的目的，即針對上述情況對蘇云金桿菌與氧化葡萄糖桿菌混合同生進行了系統研究，查明它們在同生中的相互間作用及最適反應狀態，確定生產工藝，在高效生產2-酮基-L-古龍酸的同時，生產出蘇云金桿菌，實現蘇云金桿菌生產的超低成本。

本發明的主要技術特征是：選蘇云金桿菌并與氧化葡萄糖酸桿菌1∶20～30混合，在含1～2％山梨糖種子培養基中，在28～33℃條件下振蕩同生培養20～24小時至二菌菌數之比為1/10～20，以10～15％接種量接于含山梨糖為6～14％的發酵培養液中，在28～33℃的條件下好氧發酵48～60小時至山梨糖含量降至1mg/ml以下，蘇云金桿菌芽孢達10⁹～10¹¹個/ml，發酵清液轉入2-酮基-L-古龍酸提取工藝離出菌體，殘渣干燥至商品粉劑。

本發明通過蘇云金桿菌與氧化葡萄糖酸桿菌混合同生，完好地將生物殺蟲劑與2-酮基-L-古龍酸二類生產融為一體，可使萬噸維生素C二步發酵廠每年從2-酮基-L-古龍酸收率提高中，增效2000～2500萬元，從產出的蘇云金桿菌中獲利1000萬。經濟效益大，社會和環境效益顯著。

實施例

1.分別挑取蘇云金桿菌B.tsp.529和氧化葡萄糖酸桿菌按1∶20于3升含2％山梨糖培養液中，在29℃條件下振蕩培養24小時，轉入0.5M³種子罐中(內含300升2％山梨糖種子培養液)，在29℃條件下培養至二菌菌數比為1/10～20，接入4M³發酵罐中(內含2800升10％山梨糖發酵培養液)，29℃好氧發酵52小時，山梨糖降至0.68mg/ml。2-酮基-L-古龍酸轉化率達88.65％，較對照組合菌系提高6.4個百分點，生成的蘇云金桿菌芽孢3.2×10¹⁰個/ml，達到蘇云金桿菌在通常的淀粉培養基中形成的孢子量。制劑殺蟲效果明顯，施用適應性強。

2.選蘇云金桿菌B.tsp.203與氧化葡萄糖酸桿菌混合，按上述好氧發酵48小時，山梨糖降至0.32mg/ml。2-酮基-L-古龍酸轉化率達85.50％，較對照組合菌系提高3.2個百分點，生成的蘇云金桿菌芽孢3.9×10¹⁰個/ml。

3.選蘇云金桿菌B.tsp.553與氧化葡萄糖酸桿菌混合，按上述好氧發酵48小時，山梨糖降至0.61mg/ml。2-酮基-L-古龍酸轉化率達86.44％，較對照組合菌系提高4.2個百分點，生成的蘇云金桿菌芽孢3.5×10¹⁰個/ml。