[發明專利]繁殖觀賞水草紅蛋葉的方法

無效

• 申請號: 00132166.8
• 申請日: 2000-12-19
• 公開（公告）號: CN1295789A
• 公開（公告）日: 2001-05-23
• 發明（設計）人: 李德森;盛長忠;杜榮騫
• 申請（專利權）人: 南開大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 南開大學專利事務所
• 代理人: 趙尊生

本發明是一種快速繁殖觀賞水草的方法。

紅蛋葉(Echinodorus?rubra-osiris)，澤瀉科，刺果澤瀉屬，名貴觀賞水草，是一種自然雜交的園藝種，屬水生植物。由于不能開花結實，所以沒有種子，無法有性繁殖，常利用母株萌發出的少量不定芽或新芽進行繁殖，繁殖系數極低(《觀賞水草》李尚志，中國林業出版社，1996.9)。種苗數量少，無性繁殖受到限制。至今未見其它繁殖方法的報道。

本發明的目的是提供一種新的繁殖觀賞水草紅蛋葉的方法，可以克服無性繁殖所受到的限制，解決了種苗大量繁殖的難題。

本發明是采用紅蛋葉莖間腋芽為外植體，在特定培養條件下經離體培養，誘導腋間不定芽萌發，快速繁殖試管苗。

本發明的具體實施步驟詳細描述如下：

外植體的消毒。將由水中采集到的正常生長植株，去掉葉片、葉柄和根，保留帶腋芽的莖段。用自來水沖洗，在超凈工作臺內先用75％酒精消毒1-2分鐘，用無菌水清洗，連續兩次。再用10％次氯酸鈣消毒8-15分鐘，最后用無菌水反復沖洗5次以上。

初始培養。將消毒的莖段消毒時外露的切面切去，露出新的切面，再切成0.5-1.0cm長的帶芽莖段，接入已制備好的初始培養基中(初始培養基以MS培養基為基本培養基附加0.7％瓊脂+2％蔗糖+6-BA?2-4mg/L+NAA?0.1-1mg/L，PH?5.8)。在室溫25-27℃的培養室內補充光照8小時。15-25天莖間腋芽萌生出帶葉的幼芽。用相同的培養基和培養方法再連續培養二代(40-50天)，即得到具有3-5個不定芽的叢生芽，成為中間繁殖體。

增殖培養。將獲得的中間繁殖體切成2-4塊保留有1-3個不定芽的叢生芽塊，轉入增殖培養基(增殖培養基：MS+0.9％瓊脂+3％蔗糖+6-BA?1-3mg/L+NAA?0.1-0.2mg/L，PH?5.8)。培養條件與初始培養相同。培養周期30-45天。用同一種方法在同一培養基上連續增殖培養，提高繁殖率。在增殖培養中，每個不定芽長成具有根、莖、葉的幼苗，并且基部還萌發出少量的不定芽。

試管苗的水培。取出具有根、莖、葉的幼苗，用清水洗去培養基，直接移入水中，不用緩苗即可生長。水溫保持在25-30℃，還要有適當的光照。

由于本發明在初始培養基中獲得中間繁殖體后，在以后的快速繁殖中只使用一種增殖培養基即可獲得完整的試管苗和用于增殖培養的叢生不定芽。方法簡單、培養成本低、繁殖率高，單芽年有效繁殖率=[3(繁殖系數)×80％(成苗率)]⁸(年繼代次數)=1100。

實施例

采南開大學生命科學學院水生植物培養箱正常生長的紅蛋葉植株，取帶腋芽的莖段，水洗，酒精消毒2分鐘，用無菌水清洗2次，用10％次氯酸鈣消毒15分鐘，最后用無菌水反復沖洗5次；接入已制備好的初始培養基中，初始培養基為MS+0.7％瓊脂+2％蔗糖+6-BA?2mg/L+NAA?0.1mg/L，在室溫27℃的培養室內補充光照8小時，經過25天即得莖間腋芽萌生出帶葉的幼芽；用相同的培養基和培養方法再連續培養二代，得到具有5個不定芽的叢生芽，成為中間繁殖體。將離體培養獲得無菌的中間繁殖體，接種在添加了6-BA?3mg/L、NAA?0.2mg/L、3％蔗糖、0.9％瓊脂的MS培養基中，每瓶6塊，在恒溫27℃的培養室培養。培養中每天人工光照8-10小時。培養45天后，在無菌條件下，切取新萌生的叢生不定芽，繼續增殖培養，提高繁殖率。將具有根、莖、葉的幼苗用清水洗去培養基，直接移入水中培養，繁殖新植株。繁殖新植株結果見附圖一-圖三。圖一為具有不定芽的叢生芽增殖培養。圖二為具有根、莖、葉的幼苗。圖三為水培試管苗。