[發明專利]一種體外免疫人B淋巴細胞生產人單克隆抗體的方法無效
| 申請號： | 00129579.9 | 申請日： | 2000-10-08 |
| 公開（公告）號： | CN1348011A | 公開（公告）日： | 2002-05-08 |
| 發明（設計）人： | 于永利 | 申請（專利權）人： | 于永利 |
| 主分類號： | C12P21/08 | 分類號： | C12P21/08 |
| 代理公司： | 北京海虹嘉誠專利代理有限公司 | 代理人： | 張濤 |
| 地址： | 100086 北京市海淀區海淀路1*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 體外 免疫 淋巴細胞 生產 單克隆抗體 方法 | ||
1.一種體外生產人源化單克隆抗體的方法，其特征在于用加載抗原的人樹突狀細胞免疫人外周血單核細胞，然后用病毒轉化其中的生產特異性抗體的B淋巴細胞，以生產針對上述抗原的特異性人源化單克隆抗體；進一步，其特征在于該方法包括以下步驟：
????1)分離、培養與鑒定人樹突狀細胞；
????2)應用抗原加載由上述步驟1)得到的人樹突狀細胞；
????3)分離人外周血單核細胞；
????4)應用由上述步驟2)得到的加載抗原的人樹突狀細胞免疫由上述步驟3)得到的人B淋巴細胞；
????5)應用病毒轉化由上述步驟4)得到的被免疫的人B淋巴細胞；
????6)克隆化培養由上述步驟5)得到的轉化細胞；
????7)應用ELISA方法篩選由上述步驟6)得到的生產針對上述抗原的特異性單克隆抗體的轉化細胞克隆；
????8)擴增、保存由上述步驟7)得到的生產上述特異性單克隆抗體的B淋巴細胞；
????9)培養由上述步驟8)得到的生產上述特異性人單克隆抗體的B淋巴細胞；
????10)分離純化由上述步驟9)得到的針對上述抗原的特異性人源化單克隆抗體。
2.權利要求1的方法，其中所說的病毒為EB病毒；
3.權利要求1的方法，其中所說的抗原包括任何一種可刺激產生單克隆抗體的抗原；
4.權利要求3的抗原，其中所說的抗原是人腫瘤壞死因子(TNF)；
5.權利要求3的抗原，其中所說的抗原是HER2抗原；
6.權利要求1的方法，其中所說的人源化單克隆抗體包括任何一種用權利要求1提供的方法生產的針對權利要求3的抗原的人源化單克隆抗體；
7.權利要求6的人源化單克隆抗體，其中所說的人源化單克隆抗體是抗人腫瘤壞死因子(TNF)的人源化單克隆抗體；
8.權利要求6的人源化單克隆抗體，其中所說的人源化單克隆抗體是抗HER2抗原的人源化單克隆抗體。
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