[發(fā)明專利]一種血液分析用無氰溶血濟(jì)

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 00129109.2
• 申請(qǐng)日: 2000-09-19
• 公開（公告）號(hào): CN1344933A
• 公開（公告）日: 2002-04-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉廣;陽清平;彭宗懷
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 劉廣;陽清平;彭宗懷
• 主分類號(hào): G01N33/52
• 分類號(hào): G01N33/52
• 代理公司: 長沙市融智專利事務(wù)所
• 代理人: 顏勇

本發(fā)明公開了一種血液分析用溶血?jiǎng)貏e是指一種血液分析用無氰溶血?jiǎng)?/p>

溶血?jiǎng)┦轻t(yī)學(xué)檢驗(yàn)中血液分析儀最常用的試劑之一，是測(cè)定血紅蛋白(Hb)和白細(xì)胞(WBC)計(jì)數(shù)或分類的關(guān)健試劑。它在稀釋液的配合作用下，一方面使紅細(xì)胞(RBC)迅速溶解，釋放出血紅蛋白與溶血?jiǎng)┙Y(jié)合形成穩(wěn)定的血紅蛋白衍生物，以供定量測(cè)定Hb，另一方面使白細(xì)胞維持顆粒狀，并保持一定的體積，供WBC計(jì)數(shù)用。1996年，國際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)推薦氰化高鐵血紅蛋白(HiCN)測(cè)定法作為國際Hb測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)方法，其主要物理指標(biāo)為：在波峰λ＝540nm，波谷λ＝504nm時(shí)，具有明顯的波峰、波谷。該法雖然能較精確地測(cè)量Hb；但不能同時(shí)測(cè)定WBC，因而，無法應(yīng)用于臨床；目前國內(nèi)、外臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)上常用的溶血?jiǎng)┦且杂袡C(jī)季胺鹽加氰化鉀(KCN)組成的混合物，一方面其吸收光譜與HiCN較為接近，另一方面，有機(jī)季胺鹽破壞RBC后，Hb與KCN迅速生成穩(wěn)定的CNHb，達(dá)到測(cè)定Hb的目的，同時(shí)又不破壞WBC；但這種配伍的溶血?jiǎng)渥畲笕秉c(diǎn)是KCN有劇毒，不僅嚴(yán)重危害實(shí)驗(yàn)室工作人員的身體健康，同時(shí)，對(duì)環(huán)境污染也極為嚴(yán)重，雖然臨床上制定了極為嚴(yán)格、繁鎖的降低氰污染措施，但其對(duì)人身、環(huán)境的污染還是無法避免。

本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)之不足而提供一種既能迅速破壞RBC，又不損害WBC，且其吸收光譜接近HiCN，物理化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定的，無氰的溶血?jiǎng)????

本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的：一般是由在1升重蒸餾水溶劑中，分別加入有機(jī)季胺鹽4-120g、羥胺鹽0.1-20g及弱堿性試劑1-100g組成的混合液構(gòu)成。

本發(fā)明中，季胺鹽可在十六烷基三甲基氯化(溴化)銨、十二烷基三甲基氯化(溴化)銨、十八烷基三甲基氯化(溴化)銨、十四烷基三甲基氯化(溴化)銨中任選一種。

本發(fā)明中，羥胺鹽可在鹽酸羥胺鹽、硫酸羥胺鹽中任選一種。

本發(fā)明中，弱堿性試劑可在磷酸氫二鈉、磷酸氫二鉀中任選一種。

本發(fā)明由于采用上述方案，利用同為金屬離子掩蔽劑的羥胺鹽代替氰化鉀，使其與溶血液反應(yīng)后，形成穩(wěn)定的血紅蛋白衍生物，且在λ＝540nm，λ＝504nm時(shí)，吸收光譜具明顯的波峰、波谷，吸收光譜曲線與HiCN吸收光譜曲線相似，可滿足臨床檢驗(yàn)的需要；同時(shí)，試劑中不含氰化物，無氰性，能有效改善操作人員的工作環(huán)境，降低氰物對(duì)人身心健康的傷害。可作為現(xiàn)有溶血?jiǎng)┑母聯(lián)Q代產(chǎn)品。

本發(fā)明一種血液分析用無氰溶血?jiǎng)┑闹谱鞣椒ê喪鲇谙拢????

稱取十六烷基三甲基溴化銨(CTAB：分析純)50g，鹽酸羥胺(分析純)4.0g，Na₂HPO₄.12H₂O(分析純)50g于溶器內(nèi)，加入200ml左右重蒸餾水溶解，然后，補(bǔ)充重蒸餾水至1升，將溶液過濾，分裝即可。

下面結(jié)合本發(fā)明的實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)說明：

附表1為本發(fā)明三種實(shí)施例的配伍組成。

附表2為本發(fā)明三種實(shí)施例的物理性能數(shù)據(jù)。

附表3為本發(fā)明三種實(shí)施例應(yīng)用于血常規(guī)檢驗(yàn)的檢驗(yàn)結(jié)果。

附圖為本發(fā)明三種實(shí)施例的吸收光譜曲線。

附圖中，曲線1為：HiCN-Hb的標(biāo)準(zhǔn)吸收光譜曲線。曲線2為：季胺鹽-KCN-Hb的標(biāo)準(zhǔn)吸收光譜曲線。曲線3、4、5則為1、2、3號(hào)試劑的標(biāo)準(zhǔn)吸收光譜曲線。

試驗(yàn)條件：

1、儀器：CD?1500、F800型血球計(jì)數(shù)儀、722型分光光度計(jì)。

2、方法：取20份正常人EDTA-K₂抗凝血樣品，按儀器規(guī)定用稀釋液稀釋后，分別加入季胺鹽-KCN，1、2、3號(hào)試劑，(1號(hào)試劑采用F800型血球計(jì)數(shù)儀，其余試劑采用CD?1500血球計(jì)數(shù)儀。)先進(jìn)行Hb、WBC分類計(jì)數(shù)；然后用722型分光光度計(jì)測(cè)定溶血后形成的血紅蛋白衍生物的吸收光譜。

從表1、表2、表3及附圖所示結(jié)果為：

1、本發(fā)明的物理性能指標(biāo)滿足標(biāo)準(zhǔn)要求，在λ＝540nm，λ＝504nm時(shí)具明顯的波峰、波谷。

2、血常規(guī)檢驗(yàn)結(jié)果：誤差＜4％，滿足臨床檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)要求，可應(yīng)用于臨床檢驗(yàn)中。

綜上所述：本發(fā)明組份簡單，配制方便，性能穩(wěn)定，能滿足臨床血常規(guī)檢驗(yàn)的需要，無氰，可有效改善臨床檢驗(yàn)人員的工作環(huán)境，降低毒物對(duì)人體身心的傷害，適于作為現(xiàn)有溶血?jiǎng)┑母聯(lián)Q代產(chǎn)品。

表一表二表三：