[發(fā)明專利]一種新的多肽——人突觸小泡蛋白31.46和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 00127868.1
• 申請日: 2000-12-13
• 公開（公告）號: CN1358753A
• 公開（公告）日: 2002-07-17
• 發(fā)明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發(fā)有限公司
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K14/00;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/16;A61K38/17;A61K31/7088;A61K39/395;A61P1/04;A61P9/06;A61P11/06;A61P25/00;A61P25/28
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發(fā)明屬于生物技術領域，具體地說，本發(fā)明描述了一種新的多肽——人突觸小泡蛋白31.46，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發(fā)明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

突觸是兩個神經元之間的功能接觸點，其可對信息進行傳遞核收集，使神經沖動信息作定向傳導。按信息傳遞方式的不同，可將突觸分為電突觸和化學突觸。化學突觸包括突觸前突起始末、突觸間隙和突觸后膜三部分。在突觸前突起始末階段，釋放遞質的神經元軸突末梢形成許多突觸小泡。突觸小泡內含有神經遞質或神經肽，這些遞質通過突觸間隙形成相應的神經沖動，進而在突觸后膜與特異的受體蛋白結合以發(fā)揮其生理學活性。由此可知，含有神經遞質的突觸小泡的形成是神經遞質傳導及發(fā)揮其生物學活性的起始，該步驟的異常將直接影響相關信息在體內的傳遞，進而影響一系列相關的生物學過程的發(fā)生。突觸小泡由大量的突觸小泡蛋白組成，這些蛋白與多種體內轉運蛋白相似，其氨基酸序列中均含有高度保守的12個跨膜結構區(qū)域。該結構區(qū)域跨膜結構域是神經遞質傳導的重要通道，其突變或異常將導致神經遞質傳導異常，進而影響相關生理學反應的發(fā)生。

人們已從多種生物體內克隆得到了多種突觸小泡蛋白，包括SV2A、SV2B及SV2C。這些蛋白均具有相似的結構特征，它們的蛋白序列中均含有保守的12個跨膜結構區(qū)域。這些蛋白有的被糖基化，而有的未被糖基化。它們均在體內構成突觸小泡以傳遞神經遞質。1998年，Janz等人又從人中克隆得到了一新的突觸小泡蛋白。該蛋白亦是神經突觸小泡的重要組成成分，其蛋白序列中亦含有高度保守的12個跨膜結構區(qū)域。該蛋白僅在腦及內分泌細胞中表達，其在整個腦區(qū)域均有表達，尤其在大腦皮層的錐形神經元中高表達[Janz?R.，Hofmann?K.etal.，1998，J?Neurosci，18(22)：9269-9281]。該突觸小泡蛋白主要負責傳遞神經遞質，其突變或表達異常將導致相關神經遞質的傳遞異常，進而影響相關的體內代謝過程的發(fā)生。該蛋白在體內通常與發(fā)育代謝紊亂性疾病、神經系統(tǒng)疾病的發(fā)生密切相關。其還可用于診斷及治療上述各種疾病。

本發(fā)明新的多肽與人突觸小泡蛋白在蛋白水平上有58％的同一性和70％的相似性，且具有相似的生物學功能和結構，因而被命名為人突觸小泡蛋白31.46。

由于如上所述人突觸小泡蛋白31.46蛋白在調節(jié)細胞分裂和胚胎發(fā)育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節(jié)過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人突觸小泡蛋白31.46蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人突觸小泡蛋白31.46蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態(tài)下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發(fā)疾病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發(fā)明的一個目的是提供分離的新的多肽——人突觸小泡蛋白31.46以及其片段、類似物和衍生物。

本發(fā)明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發(fā)明的另一個目的是提供含有編碼人突觸小泡蛋白31.46的多核苷酸的重組載體。

本發(fā)明的另一個目的是提供含有編碼人突觸小泡蛋白31.46的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發(fā)明的另一個目的是提供生產人突觸小泡蛋白31.46的方法。

本發(fā)明的另一個目的是提供針對本發(fā)明的多肽——人突觸小泡蛋白31.46的抗體。

本發(fā)明的另一個目的是提供了針對本發(fā)明多肽——人突觸小泡蛋白31.46的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發(fā)明的另一個目的是提供診斷治療與人突觸小泡蛋白31.46異常相關的疾病的方法。

本發(fā)明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO：2氨基酸序列的多肽。

本發(fā)明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，該多核苷酸的序列是選自下組的一種：(a)具有SEQ?ID?NO：1中114-974位的序列；和(b)具有SEQ?ID?NO：1中1-2455位的序列。