[發明專利]一種新的多肽——人Alu－RNA結合蛋白13.75和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00127644.1
• 申請日: 2000-12-01
• 公開（公告）號: CN1355231A
• 公開（公告）日: 2002-06-26
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 復旦大學;上海博道基因技術有限公司
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K14/00;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N5/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/16;A61K38/17;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
• 代理公司: 上海正旦專利代理有限公司
• 代理人: 陸飛,姚靜芳

本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——人Alu-RNA結合蛋白13.75，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

人類Alu序列是人類基因組的內生短的轉座因子。這些因子已經累積到將近1百萬個模板，在人類基因組中占了超過5％的比例。所有的Alu重復子都具有同源序列，并且被認為是從Alu-同源區域信號識別點的7SL?RNA部分分化出來的。根據同源序列決定的進化相關性，可將Alu重復序列分為不同的亞科。[Ullu，E.，and?A.M.Weiner.1984.EMBO?J.3：3303-3310]在有些情況下，這些重復序列插入到普通基因組中可能引起遺傳性疾病[Wallace，M.R.，Anderson，L.B.et?al.，1991]或導致癌癥的發生[Miki，Y.，Nishisho，I.et?al.，1992]更有甚者，還發現有重復序列在一部分蛋白中表達[Makalowski，W.，Mitchell，G.A.，and?Labuda，D.，1994]，并且在某些癌科細胞系中也有存在[Hohjoh，H.，andSinger，M.F.，1996]。

目前，通過遷移率變動分析法，我們分離出了人Alu-RNA結合蛋白(RBP)。結果表明人18KDa?Alu-RNA結合蛋白和以前克隆的鼠14KDaSPR9/14蛋白的亞基高度同源。人類cDNA在3’編碼區還包含了一個CAG三核苷酸而在鼠的序列中沒有發現，這就說明了人類蛋白-RNA復合物在凝膠延遲定量分析中為什么會有較大的尺寸和較慢的遷移率，[Chang，D.-Y.，andR.J.Maraia.1993.J.Biol.Chem.268：6423-6428]由此證明了18KDa?Alu-RNA結合蛋白是人類SPR14-等價蛋白，如果排除C末端，Alu-RNA結合蛋白和鼠SPR14都是110個殘基。研究表明Alu-RNA結合蛋白定位在人染色體15q22，這種蛋白的特有結構將對Alu序列的進展有幫助。

組織表達研究發現，Alu-RNA結合蛋白能夠在腦中大量表達，在肝和肺中表達水平適中，而在心臟中的表達水平非常低。Alu-RNA結合蛋白在哺乳動物中是較為保守的，而在哺乳動物以外的其他種類生物中沒有存在。

通過基因芯片的分析發現，在正常腦、肝癌、肌肉、胎腦、胎腎，胎肺、胎肝、甲狀腺、胸腺、成人肝、肺、膠質瘤中，本發明的多肽的表達譜與人Alu-RNA結合蛋白的表達譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發明被命名為人Alu-RNA結合蛋白13.75。

由于如上所述人Alu-RNA結合蛋白13.75蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人Alu-RNA結合蛋白13.75蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人Alu-RNA結合蛋白13.75蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾1病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽——人Alu-RNA結合蛋白13.75以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人Alu-RNA結合蛋白13.75的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人Alu-RNA結合蛋白13.75的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產人Alu-RNA結合蛋白13.75的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽——人Alu-RNA結合蛋白13.75的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽——人Alu-RNA結合蛋白13.75的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與人Alu-RNA結合蛋白13.75異常相關的疾病的方法。

本發明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO：2氨基酸序列的多肽。

本發明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。