[發明專利]一種新的多肽——人Puralpha蛋白12.76和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00127637.9
• 申請日: 2000-12-01
• 公開（公告）號: CN1355227A
• 公開（公告）日: 2002-06-26
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 復旦大學;上海博道基因技術有限公司
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K14/00;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/16;A61K38/17;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
• 代理公司: 上海正旦專利代理有限公司
• 代理人: 陸飛,姚靜芳

本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——人Puralpha蛋白12.76，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

一種單鏈DNA的結合蛋白。它可以與DNA復制起始位置的富含嘌呤的PUR結構的(GGN)_n結合。它在啟動DNA復制中起作用。

除此以外，它還在轉錄的反式激活中起作用。【1：Cell?Mol?Biol?Res199?3；39(8)：717-25】在細胞中還可能存在一種由Ca/CaM-Purα介導的基因表達途徑調節不同的基因表達。【Cell?Mol?Biol?Res.1993；39(8)：717-25.】Purα還可以與HIV-1的RNA調節結構TAR的突起和環狀區域結合。這種結合對HIV-1基因組的有效的轉錄是非常重要的。【Gene?1998?Mar?27；210(1)：37-44】

還有證據表明Purα與細胞周期的調節有關。它可以與一種腫瘤抑制基因的產物Rb結合。Rb可以在細胞周期的G1晚期被磷酸化而激活，從而釋放出幾種細胞因子，使細胞從G1期進入S期。Purα的水平在S期的開始下降，在S期期間和G2期上升到以前的8倍，并達到頂峰。【：Cell?Growth?Differ?1998Aug；9(8)：651-65】Rb和Pur相互結合可以調節細胞周期。它們的突變可以導致發育障礙和癌癥。

Purα定位于5q31。現在已經發現在脊髓發育不良和急性非淋巴細胞白血病患者的染色體中發現5q的部分缺失，導致5q綜合癥。最近的發現表明5q31位點是最常見的缺失位點。【J?Biol?Chem?1995?Oct?13；270(41)：24352-60】

通過基因芯片的分析發現，在正常腦、肝癌、肌肉、胎腦、胎腎，胎肺、胎肝、甲狀腺、胸腺、成人肝、肺、膠質瘤中，本發明的多肽的表達譜與人Pur?alpha蛋白的表達譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發明被命名為人Pur?alpha蛋白12.76。

由于如上所述人Pur?alpha蛋白12.76蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人Pur?alpha蛋白12.76蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人Pur?alpha蛋白12.76蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾1病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽——人Pur?alpha蛋白12.76以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人Pur?alpha蛋白12.76的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人Pur?alpha蛋白12.76的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產人Pur?alpha蛋白12.76的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽——人Pur?alpha蛋白12.76的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽——人Pur?alpha蛋白12.76的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與人Pur?alpha蛋白12.76異常相關的疾病的方法。

本發明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO：2氨基酸序列的多肽。

本發明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，該多核苷酸的序列是選自下組的一種：(a)具有SEQ?ID?NO：1中449-799位的序列；和(b)具有SEQ?ID?NO：1中1-2498位的序列。

本發明另外涉及一種含有本發明多核苷酸的載體，特別是表達載體；一種用該載體遺傳工程化的宿主細胞，包括轉化、轉導或轉染的宿主細胞；一種包括培養所述宿主細胞和回收表達產物的制備本發明多肽的方法。

本發明還涉及一種能與本發明多肽特異性結合的抗體。