[發明專利]一種新的多肽——雌激素磺基轉移酶13.97和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00127400.7
• 申請日: 2000-11-10
• 公開（公告）號: CN1352271A
• 公開（公告）日: 2002-06-05
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C12N9/10
• 分類號: C12N9/10;C12N15/54;C12N15/63;C07K16/40;C12Q1/48;C12Q1/68;A61K38/45
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本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——雌激素磺基轉移酶13.97，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

雌激素磺基轉移酶是一種胞內酶，它催化利用3′-磷酸腺苷-5′-磷酰硫酸作為活化的磺酰基供體的雌激素磺基結合作用以及雌激素失活作用。研究發現，在3′-磷酸腺苷-5′-磷酰硫酸作為磺酰基供體存在時，人雌激素磺基轉移酶對于雌二醇、孕烯醇酮具有高度的親和力。另外，人雌激素磺基轉移酶亦可結合脫氫異雄甾酮，人雌激素磺基轉移酶對于類固醇的結合僅有低的底物特異性。鼠雌激素磺基轉移酶功能結構域的突變會導致其磺基轉移功能以及3′-磷酸腺苷-5′-磷酰硫酸依賴的雌激素結合能力的減落。(Qian?Y，Song?WC；1999)。

雌激素磺基轉移酶具有由α-螺旋所圍繞的中心的五線β折疊結構。在其功能結構域上具有底物或3′-磷酸腺苷-5′-磷酰硫酸結合位點，該位點顯示了關鍵的保守氨基酸殘基。雌激素磺基轉移酶功能結構域上的谷氨酸突變會使酶的活性減低。(Rana?Dajani.，et?al.；1999)。

研究發現，雌激素磺基轉移酶與激素依賴性腫瘤如乳腺癌、乳腺瘤、子宮內膜瘤，上皮細胞腫瘤以及高甘油三酯血癥(HTG)具有密切關系。(Harada?N.etal.；1999)(Pasqualini?JR，Chetrite?GS.，et?al.；1999)(Lewis?AJ，etal.；1999)

通過基因芯片的分析發現，在正常腦、肝癌、肌肉、胎腦、胎腎，胎肺、胎肝、甲狀腺、胸腺、成人肝、肺、膠質瘤中，本發明的多肽的表達譜與雌激素磺基轉移酶的表達譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發明被命名為雌激素磺基轉移酶13.97。

由于如上所述雌激素磺基轉移酶13.97蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的雌激素磺基轉移酶13.97蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新雌激素磺基轉移酶13.97蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾1病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽——雌激素磺基轉移酶13.97以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼雌激素磺基轉移酶13.97的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼雌激素磺基轉移酶13.97的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產雌激素磺基轉移酶13.97的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽——雌激素磺基轉移酶13.97的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽——雌激素磺基轉移酶13.97的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與雌激素磺基轉移酶13.97異常相關的疾病的方法。

本發明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO：2氨基酸序列的多肽。

本發明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，該多核苷酸的序列是選自下組的一種：(a)具有SEQ?ID?NO：1中919-1302位的序列；和(b)具有SEQ?ID?NO：1中1-1503位的序列。

本發明另外涉及一種含有本發明多核苷酸的載體，特別是表達載體；一種用該載體遺傳工程化的宿主細胞，包括轉化、轉導或轉染的宿主細胞；一種包括培養所述宿主細胞和回收表達產物的制備本發明多肽的方法。

本發明還涉及一種能與本發明多肽特異性結合的抗體。

本發明還涉及一種篩選的模擬、激活、拮抗或抑制雌激素磺基轉移酶13.97蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本發明的多肽。本發明還涉及用該方法獲得的化合物。