[發明專利]一種新的多肽——人纖溶酶原激活物抑制劑2－13.43和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00127368.X
• 申請日: 2000-11-10
• 公開（公告）號: CN1352165A
• 公開（公告）日: 2002-06-05
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K14/00;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/16;A61K38/17;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
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本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——人纖溶酶原激活物抑制劑2-13.43，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

纖溶酶原激活物抑制劑2是一種絲氨酸蛋白水解酶抑制物，在生物體內通過抑制尿激酶及組織纖溶酶原活性物的作用活性來調控纖溶酶的形成。與其它的絲氨酸蛋白水解酶抑制物相似，纖溶酶原激活物抑制劑2以1：1的比例與相應的絲氨酸蛋白水解酶結合，以形成沒有活性的蛋白水解酶復合物，以抑制蛋白水解酶在體內的作用活性[Richard?D.Ye，Shawn?M.Ahern?et?al.，1989，J?BiolChem，264：5495-5502]。

纖溶酶原是一種常見的絲氨酸蛋白水解酶，在生物體內參與多種不同的生理學過程，包括血纖維蛋白溶解作用、組織重建、炎癥反應及腫瘤轉移等。纖溶酶原激活物抑制劑2通過調控纖溶酶原的形成來參與調節上述各種重要的生理過程。在生物體內，纖溶酶原激活物抑制劑2通常由周邊血單細胞的內毒素及腫瘤細胞來刺激其表達與合成。纖溶酶原激活物抑制劑2的表達異常通常將導致生物體內相應的纖溶酶原的表達異常，從而影響如上所述的各種與之相關的生理學過程的異常。

研究發現，纖溶酶原激活物抑制劑2與雞的卵清蛋白非常相似，兩者在體內的分泌均不需信號肽的存在，且均在母體受孕期間的子宮內高表達，由兩者的結構與生物學活性的相似性，認為兩者在進化上亦存在著一定的相關性。1987年，Ye等人從人中克隆得到了一纖溶酶原激活物抑制劑2蛋白，該蛋白的氨基酸序列中含有三個潛在的N-糖基化位點，而其380位的精氨酸殘基位點和381位的蘇氨酸殘基位點是一典型的絲氨酸蛋白酶抑制作用中心[Ye?R.D.，Ahern?S.M.etal.，1989，J?Biol?Chem.，264：5495-502]。該蛋白在體內的表達受多種細胞因子、激素及佛波酯類物質的共同調節。

由上可知，纖溶酶原激活物抑制劑在生物體內調控著各種相關的纖溶酶原蛋白的作用活性，而纖溶酶原在生物體內參與多種重要的生理過程，如細胞組織重建、各種炎癥反應及腫瘤細胞的轉移等。纖溶酶原激活物抑制劑在生物體內正是通過調控纖溶酶原蛋白的形成來參與調控各種相關的過程的發生，該蛋白的表達異常將導致纖溶酶原的表達異常，進而影響一系列與之相關的生理過程的發生。該蛋白在生物體內通常與各種相關的炎癥反應、相關組織的腫瘤及癌癥、胚胎發育紊亂性疾病等的發生等密切相關。

通過基因芯片的分析發現，在正常腦、肝癌、肌肉、胎腦、胎腎，胎肺、胎肝、甲狀腺、胸腺、成人肝、肺、膠質瘤中，本發明的多肽的表達譜與人纖溶酶原激活物抑制劑的表達譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發明被命名為人纖溶酶原激活物抑制劑2-13.43。

由于如上所述人纖溶酶原激活物抑制劑2-13.43蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人纖溶酶原激活物抑制劑2-13.43蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人纖溶酶原激活物抑制劑2-13.43蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾1病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽——人纖溶酶原激活物抑制劑2-13.43以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人纖溶酶原激活物抑制劑2-13.43的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人纖溶酶原激活物抑制劑2-13.43的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產人纖溶酶原激活物抑制劑2-13.43的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽——人纖溶酶原激活物抑制劑2-13.43的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽——人纖溶酶原激活物抑制劑2-13.43的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與人纖溶酶原激活物抑制劑2-13.43異常相關的疾病的方法。

本發明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO：2氨基酸序列的多肽。