[發明專利]一種新的多肽——人NPAT蛋白10.01和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00127352.3
• 申請日: 2000-11-10
• 公開（公告）號: CN1352158A
• 公開（公告）日: 2002-06-05
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K14/00;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/16;A61K38/17;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——人NPAT蛋白10.01，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

人NPAT是一種基本的生理功能基因，即“管家”基因，它位于人類染色體11上的ATM基因的上游部位。ATM基因也是一種與之相類似管家基因，與一種常染色體隱性基因紊亂——毛細血管擴張共濟失調(Ataxia?telangrectasia，AT)有關。NPAT基因和ATM基因是相連的基因單位，沿著相反的方向轉錄，并且共享0.5Kb的5’側序列。

對裝載有NPAT基因的裝配型質粒克隆進行直接的序列測定，得到了NPAT的序列結構。NPAT至少有44Kb，其中包含了18個外顯子和17個內含子。

在癌癥的發展階段上，AT雜合子能夠增加癌癥的危險性，尤其是在婦女乳腺癌、子宮頸癌中。但是，經常會在乳腺癌、子宮頸癌相對應的染色體11q22—q24位點處發現其喪失雜合性，這種現象表明：11q22—q24區段上有一個癌癥遏制基因的存在(Imai?T，Sugawara?T，Nishiyama?A，1997)。

另外還發現，NPAT基因與細胞周期密切相關。NPAT是細胞周期蛋白E-CDK2的底物，在細胞周期中對于S期的到來有決定作用。在體內，NPAT蛋白能夠與細胞周期蛋白E-CDK2發生結合，并且被E-CDK2所磷酸化，其蛋白表達水平的最高點出現在細胞周期G1期向S期轉變的過渡階段上。NPAT蛋白的超表達通常加速了S階段的到來，當E-CDK2細胞周期蛋白也共同表達后這種影響會更加明顯(Zhao?J，Dynlacht?B，Imai?T，Hori?T，Harlow?E，1998)。

通過基因芯片的分析發現，在正常腦、肝癌、肌肉、胎腦、胎腎，胎肺、胎肝、甲狀腺、胸腺、成人肝、肺、膠質瘤中，本發明的多肽的表達譜與人NPAT蛋白的表達譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發明被命名為人NPAT蛋白10.01。

由于如上所述人NPAT蛋白10.01蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人NPAT蛋白10.01蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人NPAT蛋白10.01蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾1病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽——人NPAT蛋白10.01以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人NPAT蛋白10.01的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人NPAT蛋白10.01的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產人NPAT蛋白10.01的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽——人NPAT蛋白10.01的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽——人NPAT蛋白10.01的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與人NPAT蛋白10.01異常相關的疾病的方法。

本發明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO：2氨基酸序列的多肽。

本發明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，該多核苷酸的序列是選自下組的一種：(a)具有SEQ?ID?NO：1中812-1087位的序列；和(b)具有SEQ?ID?NO：1中1-2194位的序列。

本發明另外涉及一種含有本發明多核苷酸的載體，特別是表達載體；一種用該載體遺傳工程化的宿主細胞，包括轉化、轉導或轉染的宿主細胞；一種包括培養所述宿主細胞和回收表達產物的制備本發明多肽的方法。

本發明還涉及一種能與本發明多肽特異性結合的抗體。