[發明專利]一種新的多肽——人精子振蕩蛋白26.62和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00127345.0
• 申請日: 2000-11-10
• 公開（公告）號: CN1352155A
• 公開（公告）日: 2002-06-05
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K14/00;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/16;A61K38/17;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——人精子振蕩蛋白26.62，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

在哺乳動物的授精過程中，精子誘導了卵中一系列特征性的Ca²⁺振蕩，它是卵的激活和胚胎早期發育的關鍵。精子如何開始這一重要過程的機制以及釋放的細胞內Ca²⁺包圍的精子-卵膜受體的連接途徑仍然未知。向哺乳動物卵中顯微注射精子抽提物可引起與授精作用中相同的Ca²⁺振蕩，這表明在配偶子膜融合中，精子可將Ca²⁺振蕩誘導因子注入卵中。

這里，我們純化出一種可溶性精子蛋白，它可激活卵中的Ca²⁺振蕩活性。這一精子振蕩蛋白作為一個低聚物，含有一個M_r?33K的亞基和一個特定的細胞內定位物，它可定位于精子頭部的赤道部分。

通過cDNA的克隆和測序，氨基末端的氨基酸順序分析，我們已經確定了鼠類精子振蕩蛋白的主要結構。鼠類精子振蕩蛋白的cDNA從一個鼠睪丸cDNA庫中分離出來，它長1.2kb，含有一個開放閱讀框架，具有一個3′poly(A)結構。它編碼一個含289個氨基酸，分子量為33Ka，pI為6.4。

精子振蕩蛋白可引起卵中的Ca²⁺振蕩，它是哺乳動物發育的重要生理開關。同時，它也可能與體細胞中的Ca²⁺釋放有關。(John?Parrington，et.al，nature，379，25，364-368，1996)

本發明的人的基因與鼠類精子振蕩蛋白基因在蛋白水平上有82％的同一性和90％的相似性?；谝陨细鼽c，故認為本發明的新基因為精子振蕩蛋白基因，命名為{人精子振蕩蛋白26.62}。并以此推斷其與鼠類精子振蕩蛋白相似，同為精子振蕩蛋白基因家族的成員，并具有相似的生物學功能。

由于如上所述人精子振蕩蛋白26.62蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人精子振蕩蛋白26.62蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人精子振蕩蛋白26.62蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽——人精子振蕩蛋白26.62以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人精子振蕩蛋白26.62的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人精子振蕩蛋白26.62的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產人精子振蕩蛋白26.62的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽——人精子振蕩蛋白26.62的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽——人精子振蕩蛋白26.62的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與人精子振蕩蛋白26.62異常相關的疾病的方法。

本發明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO：2氨基酸序列的多肽。

本發明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少83％相同性的多核苷酸。

更佳地，該多核苷酸的序列是選自下組的一種：(a)具有SEQ?ID?NO：1中134-862位的序列；和(b)具有SEQ?ID?NO：1中1-2074位的序列。

本發明另外涉及一種含有本發明多核苷酸的載體，特別是表達載體；一種用該載體遺傳工程化的宿主細胞，包括轉化、轉導或轉染的宿主細胞；一種包括培養所述宿主細胞和回收表達產物的制備本發明多肽的方法。

本發明還涉及一種能與本發明多肽特異性結合的抗體。

本發明還涉及一種篩選的模擬、激活、拮抗或抑制人精子振蕩蛋白26.62蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本發明的多肽。本發明還涉及用該方法獲得的化合物。