[發明專利]一種新的多肽——人小分子細胞核核蛋白20.68和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00127344.2
• 申請日: 2000-11-10
• 公開（公告）號: CN1352154A
• 公開（公告）日: 2002-06-05
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K14/00;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/16;A61K38/17;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——人小分子細胞核核蛋白20.68，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

真核生物中mRNA的轉錄與加工過程較為復雜，真核生物中大多數編碼蛋白質的結構基因是不連續的基因，存在內含子，在RNA聚合酶II的作用下，這些內含子與外顯子一起被轉錄，因此mRNA的原初轉錄產物是分子量較大的前體——異質性RNA(hnRNA)。異質性hnRNA經過加工，即5’加帽，3’加多聚A及內含子的剪切和外顯子的拼接等過程，產生有功能的成熟的mRNA，釋放至細胞質中。

內含子的剪切與外顯子的連接過程是多步驟的，而且需要多種因子參與。實驗表明實在一個大小約為60S，由多種小分子細胞核核蛋白顆粒(U1^-U6?snRNP，small?nuclear?ribonucleoprotein?particles)和多種蛋白質的復合物被稱為剪切體的作用下完成的。SnRNA是細胞核中存在的另一類小分子RNA，在代謝上非常穩定，一般常見的snRNA以U1^-U6表示，除U6?snRNA被RNA聚合酶III轉錄外，其他U1～U5?snRNA均在RNA聚合酶II催化下形成。存在有轉錄后成熟的過程。SnRNA不游離存在，它們同特有的蛋白質結合成復合物，即小分子核糖核蛋白顆粒(snRNP)。

試驗表明，小分子核糖核蛋白在RNA前體的剪切過程中有重要作用。如在mRNA前體剪切作用中，U1snRNA5’端和mRNA前體內含子5’端保守序列互補，U1?snRNA和U2?snRNA分別于mRNA前體內含子5’剪切位點和內含子分子位點堿基配對形成了復合物，同時，U4、U6?snRNA彼此間堿基配對，含有與U5?snRNP結合成復合物，并與上述mRNA前體和U1、U2?snRNP的復合物結合，形成一個高分子量的60S的剪切體。剪切體完成mRNA前體的剪切過程。

試驗表明，準確的進行mRNA前體剪切過程在維持正常審理功能中發揮了重要的作用，在一切遺傳疾病如在β-地中海貧血病中發現，β-珠蛋白mRNA前體存在不正常的剪切與加工。

通過基因芯片的分析發現，在正常腦、肝癌、肌肉、胎腦、胎腎，胎肺、胎肝、甲狀腺、胸腺、成人肝、肺、膠質瘤中，本發明的多肽的表達譜與人小分子細胞核核蛋白的表達譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發明被命名為人小分子細胞核核蛋白20.68。

由于如上所述人小分子細胞核核蛋白20.68蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人小分子細胞核核蛋白20.68蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人小分子細胞核核蛋白20.68蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾1病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽——人小分子細胞核核蛋白20.68以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人小分子細胞核核蛋白20.68的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人小分子細胞核核蛋白20.68的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產人小分子細胞核核蛋白20.68的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽——人小分子細胞核核蛋白20.68的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽——人小分子細胞核核蛋白20.68的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與人小分子細胞核核蛋白20.68異常相關的疾病的方法。

本發明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO：2氨基酸序列的多肽。

本發明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。