[發明專利]一種新的多肽——人蛋白磷酸酶13.64和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00127328.0
• 申請日: 2000-11-10
• 公開（公告）號: CN1352290A
• 公開（公告）日: 2002-06-05
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C12N9/18
• 分類號: C12N9/18;C12N15/55;C12N15/63;C07K16/40;C12Q1/42;C12Q1/68;A61K38/46
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本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——人蛋白磷酸酶13.64，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

表達于雌激素(E)和羥基-二苯氧胺(HT)調節的人乳腺上皮細胞(HMEC)中，生物學家最近發現的一個新蛋白又表達于雌激素受體的表達過程，該蛋白取名為雌激素效應B盒蛋白(EBBP)。EBBP有564個氨基酸殘基有一個結構基元，該基元包含兩個半胱氨酸和組氨酸富含B盒結構域和一個卷曲螺旋區域，該螺旋區域是B盒鋅指蛋白家族的特征，該蛋白家族成員表達于各種生物過程，包括細胞的生長和分化[Cao?T，Shannon?M，Handel?MA，Etkin?LD?1996.Dev?Genet19：309-320]，轉錄調節[LeDouarin?B，Zechel?C，Garnier?JM，Lutz?Y，Tora?L，etal.，1995.EMBO?J14：2020-2033]等等。大多數該家族蛋白都有一個N末端鋅指結構。EBBP因為沒有這個結構域而屬于B盒包含蛋白亞家族，該家族蛋白包括ATDC、pyrin、KIAA0129和1A1.3B/Nb?r1[Henry?J，Ribouchon?M，Depetris?D，Mattei?M，etal.，1997.Immunogenetics?46：383-395]。在這些蛋白中只有EBBP、pyrin和KIAA0129包含一個C末端170個氨基酸的B30.2結構域[Henry?J，RibouchonMT，Offer?C，Pontarotti?P?1997.Biochem?Biophys?Res?Commu?N?235：162-165]。嗜乳酯蛋白的B30.2結構域已經被證明與乳汁的分泌有關，并且pyrin?B30.2結構域的錯義突變與家族地中海發熱直接相關。在EBBP的生化功能中，B30.2結構域起著重要的作用。

Northem雜交實驗表明，EBBP廣泛表達于除肝臟和外部血淋巴細胞以外幾乎所有組織，并且其基因定位于人染色體17p11.2。與大多數B盒家族蛋白成員相比，EBBP有一個主要的細胞質位點。

EBBP基因在永生的非腫瘤HMEC表達外生ER中是一個修飾基因。與其他E和HT效應基因不同的是，EBBP基因的修飾作用沒有DNA結合能力[Hsiao-LaiC.Liu，Elina?GoldEr-Novoselsky，Marian?H.Seto，Lynn?Webster?etal.，1998.Mol.Endocrinol.12(11)，1733-1748]。

通過基因芯片的分析發現，在正常腦、肝癌、肌肉、胎腦、胎腎，胎肺、胎肝、甲狀腺、胸腺、成人肝、肺、膠質瘤中，本發明的多肽的表達譜與人蛋白磷酸酶的表達譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發明被命名為人蛋白磷酸酶13.64。

由于如上所述人蛋白磷酸酶13.64蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人蛋白磷酸酶13.64蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人蛋白磷酸酶13.64蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾1病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽——人蛋白磷酸酶13.64以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人蛋白磷酸酶13.64的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人蛋白磷酸酶13.64的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產人蛋白磷酸酶13.64的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽——人蛋白磷酸酶13.64的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽——人蛋白磷酸酶13.64的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與人蛋白磷酸酶13.64異常相關的疾病的方法。

本發明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO：2氨基酸序列的多肽。

本發明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：