[發明專利]一種新的多肽——醛/酮還原酶8.8和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00127325.6
• 申請日: 2000-11-10
• 公開（公告）號: CN1352260A
• 公開（公告）日: 2002-06-05
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C12N9/02
• 分類號: C12N9/02;C12N15/53;C12N15/63;C07K16/40;C12Q1/26;C12Q1/68;A61K38/44
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本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——醛/酮還原酶8.8，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

醛/酮還原酶家族包括許多結構、功能依賴于NADPH的氧化還原酶和其他一些蛋白。這些酶可以參與催化還原范圍廣泛的羧基化合物，如糖、葡萄醛酸、醇激素以及醛、酮的一些異源物質。

醛/酮還原酶家族的成員通常由約300個氨基酸殘基組成。其保守序列有3個，第一個位于N端，序列為G-(FY)-R-(HSAL)-(LIVMF)-D-(STAGC)-(AS)-X(5)-E-X-G；第二個位于中部，序列為(LIVFMY)-X(9)-(KREQ)-X-(LIVM)-G-(LIVM)-(SC)-N-(FY)(嗎啡-6-脫氫酶無此結構)；第三個位于C端，序列為(LIVM)-(PAIV)-(KR)-(ST)-X(4)-R-X(2)-(GSTAEQK)-(NSL)-X(2)-(LIVMFA)(大腸桿菌假設蛋白yafB無此結構)；K是一個活性位點殘基，5-磷酸-砒哆醛通過對Lys的化學修飾，進而影響酶的催化效率。

二級結構分析顯示，這些蛋白質都有β8/α8桶狀結構。由于一些隨意選擇的介入，這個桶狀結構并非完全對稱。

醛/酮還原酶家族由一些酶功能和結構相似的蛋白組成，這些蛋白的保守序列顯示了它們在演化過程中的相關性。這些相似性可以用來解釋酶底物的非專一性與不可預測性，還可以證明為什么醛糖還原酶抑制劑在治療糖尿病并發癥方面的低效及副作用。

通過基因芯片的分析發現，在正常腦、肝癌、肌肉、胎腦、胎腎，胎肺、胎肝、甲狀腺、胸腺、成人肝、肺、膠質瘤中，本發明的多肽的表達譜與醛/酮還原酶的表達譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發明被命名為醛/酮還原酶8.8。

由于如上所述醛/酮還原酶8.8蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的醛/酮還原酶8.8蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新醛/酮還原酶8.8蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾1病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽——醛/酮還原酶8.8以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼醛/酮還原酶8.8的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼醛/酮還原酶8.8的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產醛/酮還原酶8.8的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽——醛/酮還原酶8.8的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽——醛/酮還原酶8.8的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與醛/酮還原酶8.8異常相關的疾病的方法。

本發明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO：2氨基酸序列的多肽。

本發明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，該多核苷酸的序列是選自下組的一種：(a)具有SEQ?ID?NO：1中365-607位的序列；和(b)具有SEQ?ID?NO：1中1-1355位的序列。

本發明另外涉及一種含有本發明多核苷酸的載體，特別是表達載體；一種用該載體遺傳工程化的宿主細胞，包括轉化、轉導或轉染的宿主細胞；一種包括培養所述宿主細胞和回收表達產物的制備本發明多肽的方法。

本發明還涉及一種能與本發明多肽特異性結合的抗體。

本發明還涉及一種篩選的模擬、激活、拮抗或抑制醛/酮還原酶8.8蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本發明的多肽。本發明還涉及用該方法獲得的化合物。