[發明專利]一種新的多肽——人NF－E2相關因子13.2和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00127265.9
• 申請日: 2000-11-06
• 公開（公告）號: CN1352127A
• 公開（公告）日: 2002-06-05
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K14/00;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/16;A61K38/17;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18;A61P43/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——人NF-E2相關因子13.2，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

生物體內特定生理過程的完成需多種組織或發育階段特異轉錄因子的調控來實現。如：轉錄調控因子NF-E2是膽色素原脫氨基酶基因細胞胞質內特異表達的重要調節因子。NF-E2在體內通過與一些特定的細胞胞類基因結合，以調控相關基因的轉錄與表達。NF-E2蛋白由P45及MafK兩個亞單位組成。其中P45亞單位為CNC蛋白家族的成員，其蛋白序列中含有一亮氨酸拉鏈結構域，該結構域在CNC蛋白家族中高度保守的序列基序。在眾多哺乳動物轉錄因子中均含有該結構基序，其可能是蛋白發揮正常生理學活性的重要活性中心。NF-E2蛋白的另一組成亞單位由小的Maf蛋白組成，這些蛋白均為原癌基因蛋白家族中的成員，其突變或表達異常可能與生物體內相關組織的腫瘤及癌癥等疾病的發生密切相關。

對各種轉錄調節因子NF-E2的結構進行研究發現，所有蛋白均具有相似的結構特征。其小Maf蛋白組成的亞單位中含有一識別DNA片段的結構基序，被稱為Maf識別元素MARE，由如下保守的序列片段組成：TGCTGA(G/C)TCAGCA或TGCTGACGTCAGCA；另外，NF-E2蛋白的氨基酸序列中還含有如下所示的高度保守的序列片段：TGCTGA(G/C)TCA(T/C)，該序列片段蛋白與DNA結合的調節中心，調控著蛋白與DNA結合的活性。以上兩個保守的序列片段在蛋白作用過程中協同作用，通過與特定的DNA結合來調節基因的轉錄與表達。該蛋白在B細胞及單細胞系中均有較高的表達量，其可能與免疫系統相關基因的表達相關。其表達異常可能將導致相關的免疫系統的作用異常，即引發各種相關的疾病。

1999年，Akira等人從人中克隆得到了一CNC蛋白家族的新成員，NF-E2相關因子3(Nrf3)。該基因編碼一73KDa大的蛋白，是NF-E2蛋白的一新的組成成分，其氨基酸序列中亦含有CNC蛋白家族的高度保守的亮氨酸拉鏈結構域。該基因位于人染色體的7p14-15位點，與其它CNC蛋白家族的成員相似，這些蛋白均分布在HOX基因簇的附近。其在生物體內與NF-E2蛋白的其它功能單位協同作用，通過調控多種相關基因的轉錄與表達來調節生物體內多種重要的生理過程的進行[Akira?Kobayashi，Etsuro?Ito?et?al.，1999，J?Biol?Chem，274：6443-6452]。

由上可知，NF-E2相關因子3(Nrf3)作為CNC蛋白家族的新成員，與該家族的其它成員具有相似的結構特征，并具有相似的生理學功能。該蛋白在B細胞及各種單細胞系中均有較高的表達量，其可能在B細胞的發育及作用過程中起重要的調控作用。該蛋白的突變或表達異常將導致相關細胞的發育及作用異常，其通常與生物體內各種相關的免疫系統紊亂性疾病、相關組織的腫瘤及癌癥等疾病的發生密切相關。

通過基因芯片的分析發現，在正常腦、肝癌、肌肉、胎腦、胎腎，胎肺、胎肝、甲狀腺、胸腺、成人肝、肺、膠質瘤中，本發明的多肽的表達譜與人NF-E2相關因子的表達譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發明被命名為人NF-E2相關因子13.2。

由于如上所述人NF-E2相關因子13.2蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人NF-E2相關因子13.2蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人NF-E2相關因子13.2蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾1病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽——人NF-E2相關因子13.2以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人NF-E2相關因子13.2的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人NF-E2相關因子13.2的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產人NF-E2相關因子13.2的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽——人NF-E2相關因子13.2的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽——人NF-E2相關因子13.2的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與人NF-E2相關因子13.2異常相關的疾病的方法。