[發(fā)明專利]一種新的多肽——淀粉類前體蛋白結(jié)合蛋白13.42和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 00127264.0
• 申請日: 2000-11-06
• 公開（公告）號: CN1352014A
• 公開（公告）日: 2002-06-05
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權(quán)）人: 上海博德基因開發(fā)有限公司
• 主分類號: C07K14/00
• 分類號: C07K14/00;C07K14/435;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/16;A61K38/17;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
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本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體地說，本發(fā)明描述了一種新的多肽--淀粉類前體蛋白結(jié)合蛋白13.42，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發(fā)明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應(yīng)用。

阿爾茲海默氏癥(Alzheimer?disease)的特點是神經(jīng)元數(shù)目減少，并且在腦內(nèi)的β淀粉類小體增多。β淀粉類小體是由β淀粉類小體肽(beta-amyloidpeptide，AP)構(gòu)成的。AP大小約4kDa，是由β-淀粉類前體蛋白β-amyloidprotein?precursor(APP)加工而成的可溶性蛋白水解產(chǎn)物。研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)APP發(fā)生AD相關(guān)的突變時，會導(dǎo)致AP分泌的增加，或者AP_1-42/AP_1-40的比值發(fā)生變化。APP的超表達(dá)或者是包含AP結(jié)構(gòu)域的APP的C末端的超表達(dá)對神經(jīng)元有毒害作用。

APP在高爾基體中加工為成熟的蛋白質(zhì)后運(yùn)輸?shù)郊?xì)胞表面。之后或者被分泌出細(xì)胞外，或者成為內(nèi)在蛋白固定在細(xì)胞膜上。APP起到一定的物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)的作用。例如，將APP的YENPTY序列切除就會影響細(xì)胞表面的APP的內(nèi)吞作用，還會使APP在沒有到達(dá)細(xì)胞表面之前就進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)途徑，從而打亂了細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的運(yùn)輸。

APP的作用與幾種細(xì)胞因子有關(guān)。其中一種是FE65蛋白。FE65可以與APP的胞質(zhì)端相結(jié)合。FE65在鼠腦中大量分布，在細(xì)胞內(nèi)分布在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)/高爾基體中。FE65可以增高結(jié)合到細(xì)胞表面的APP數(shù)量，還可以提高APP和AP的分泌量?！綣Biol?Chem，Vol.274，Issue?12，7952-7957，March?19，1999】

在人中發(fā)現(xiàn)了幾種APP的作用因子，其中一種為人hFE65L蛋白。該蛋白的C端部分可以與APP的胞質(zhì)部分相互作用。對其結(jié)構(gòu)的分析發(fā)現(xiàn)hFE65L包含幾個與信號傳遞和調(diào)節(jié)相關(guān)的結(jié)構(gòu)域，暗示其與這類功能有關(guān)。并且hFE65L與鼠FE65L同源?！綪roc?Natl?Acad?Sci?USA?1996?Oct?1；93(20)：10832-7】

通過基因芯片的分析發(fā)現(xiàn)，在正常腦、肝癌、肌肉、胎腦、胎腎，胎肺、胎肝、甲狀腺、胸腺、成人肝、肺、膠質(zhì)瘤中，本發(fā)明的多肽的表達(dá)譜與淀粉類前體蛋白結(jié)合蛋白的表達(dá)譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發(fā)明被命名為淀粉類前體蛋白結(jié)合蛋白13.42。

由于如上所述淀粉類前體蛋白結(jié)合蛋白13.42蛋白在調(diào)節(jié)細(xì)胞分裂和胚胎發(fā)育等機(jī)體重要功能中起重要作用，而且相信這些調(diào)節(jié)過程中涉及大量的蛋白，因而本領(lǐng)域中一直需要鑒定更多參與這些過程的淀粉類前體蛋白結(jié)合蛋白13.42蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新淀粉類前體蛋白結(jié)合蛋白13.42蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態(tài)下的作用提供了基礎(chǔ)。這種蛋白可能構(gòu)成開發(fā)疾1病診斷和/或治療藥的基礎(chǔ)，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發(fā)明的一個目的是提供分離的新的多肽--淀粉類前體蛋白結(jié)合蛋白13.42以及其片段、類似物和衍生物。

本發(fā)明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發(fā)明的另一個目的是提供含有編碼淀粉類前體蛋白結(jié)合蛋白13.42的多核苷酸的重組載體。

本發(fā)明的另一個目的是提供含有編碼淀粉類前體蛋白結(jié)合蛋白13.42的多核苷酸的基因工程化宿主細(xì)胞。

本發(fā)明的另一個目的是提供生產(chǎn)淀粉類前體蛋白結(jié)合蛋白13.42的方法。

本發(fā)明的另一個目的是提供針對本發(fā)明的多肽--淀粉類前體蛋白結(jié)合蛋白13.42的抗體。

本發(fā)明的另一個目的是提供了針對本發(fā)明多肽--淀粉類前體蛋白結(jié)合蛋白13.42的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發(fā)明的另一個目的是提供診斷治療與淀粉類前體蛋白結(jié)合蛋白13.42異常相關(guān)的疾病的方法。

本發(fā)明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO：2氨基酸序列的多肽。

本發(fā)明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補(bǔ)的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，該多核苷酸的序列是選自下組的一種：(a)具有SEQ?ID?NO：1中1412-1780位的序列；和(b)具有SEQ?ID?NO：1中1-4035位的序列。