[發明專利]一種新的多肽——人鋅指蛋白11和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00127244.6
• 申請日: 2000-11-06
• 公開（公告）號: CN1352113A
• 公開（公告）日: 2002-06-05
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K14/00;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/16;A61K38/17;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
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本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——人鋅指蛋白1，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

真核基因的轉錄調控對于基因的正常表達及發揮生物學功能是十分重要的，通常由轉錄調控因子來完成這一過程。轉錄調控因子在生物體內參與決定基因在何種組織及何種發育階段開始轉錄，編碼這類蛋白的基因如發生突變，不但該基因自身不能正常表達，而且受其調節的許多基因也不能正常的進行轉錄與表達。轉錄因子對基因表達的調控主要通過轉錄因子與特定的DNA序列結合、轉錄因子間的相互作用及轉錄因子與常規轉錄機構的相互作用在完成。根據結構基序的不同，已知的DNA結合蛋白可主要分為兩類：含有螺旋-轉角-螺旋基序的蛋白及鋅指蛋白[Kamal?Chowdhury，Heidi?Rohdewohld?et?al.，Nucleic?AcidsResearch，1988，16：9995-10011]。

鋅指蛋白是一種DNA結合蛋白，最早在非洲爪蟾RNA聚合酶III介導的5S?rRNA基因轉錄因子TF?III?A蛋白的氨基酸序列中發現。此后發現鋅指蛋白在不同生物的各種組織中均有表達，這些組織包括造血細胞、腦、神經系統、表皮組織、各種與分泌吸收相關的組織及與腫瘤和無限增殖細胞系相關的組織等。據估計在人類基因組上鋅指蛋白基因超過了1％(Bellefroid?et?al.，1989；Pellegrino?andBerg，1991)。鋅指蛋白的鋅指結構主要有以下幾種：C2H2構型、C2C2構型、C2HC構型、C2HC4C構型、C3H構型、C3HC4構型(Dai?KS?et?al.，1998)。其中含C2H2構型的鋅指蛋白基因構成人類基因組最大的一族基因(Berker?et?al.，1995)。鋅指蛋白的C2H2構型如下：

典型的鋅指結構在長度上大約由28個氨基酸殘基構成，為Cys-Cys……His-His排列，鋅指單元包含有一段相對保守的序列：Cys-X_2-4-Cys-X₃-Phe-X₅-Leu-X₂-His-X_2-4-His(Bray，p.et?al.，1993)。鋅指結構中兩個保守的Cys參與組成一個反向平行的β折疊，兩個保守的His參與組成α螺旋，這兩個結構與核心的Zn原子結合形成一個緊密的球形區域(Pabo，C.A.andSauer，R.T，1992)。此類鋅指蛋白往往具有1個到100個鋅指結構(Rhodes，D.andKlug，1993)。除了保守的鋅指結構，連接兩個相鄰的Kruppel的C2H2構型鋅指蛋白常常但不總是包含保守的特異性氨基酸序列TGEKP(Bray，p.etal.，1993)。在鋅指蛋白中，Zn的作用是使蛋白質分子形成指型構象的骨架與DNA結合。

鋅指結構在許多與“蛋白-核酸”和“蛋白-蛋白”相互作用有關的蛋白里都有發現。鋅指蛋白可以與雙鏈DNA(dsDNA)或單鏈RNA結合，執行著許多重要作用，其最重要的功能涉及基因的轉錄調控，并可能同時有信號傳遞因子的作用(EMBO?J.12：1363-1374，1993)。現有的研究表明，C2H2類型的鋅指結構域在發育調控中起關鍵作用。例如，在Drosopila?Kruppel(Rosenberg，1986)和hunchback(Tautz，1987)鋅指蛋白中，此結構域與胚胎模式形成有關；在鼠Krox-20鋅指蛋白中，此結構域與后腦模式形成及細胞增殖控制有關(Chavrier，1988；Wilkinson，1989)，GL13在常染色體顯性發育異常Greig綜合癥中(vortkamp，1991)中；有些鋅指蛋白基因與腫瘤形成有關，如WT1在Wilm’s腫瘤及先天性生殖尿道發育中(Haber，1990)。

經研究發現，人鋅指蛋白131-140，142，143，148，151，154，155都屬于人鋅指蛋白Kruppel基因家族，并從人胰島瘤細胞cDNA中分離得到(Tommerup?andVissing，Genomics?27：259-264，1995)。人鋅指蛋白138，139，143分別與Williams綜合癥、裂手裂腳癥、貝魏二氏綜合癥有關；人鋅指蛋白132，134，135，137，154，155均可引起實體瘤如甲狀腺腺瘤；人鋅指蛋白151與成神經細胞瘤、結腸癌、乳腺癌或其它腫瘤密切相關；人鋅指蛋白139，148，151可引起血液性惡性疾病如白血病、非何杰金氏淋巴瘤(Genomics?27：259-264，1995)。