[發(fā)明專利]一種新的多肽——磷酸核糖甘氨酰胺合成酶10.34和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 00127215.2
• 申請日: 2000-11-06
• 公開（公告）號: CN1352247A
• 公開（公告）日: 2002-06-05
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權(quán)）人: 上海博德基因開發(fā)有限公司
• 主分類號: C12N9/00
• 分類號: C12N9/00;C12N15/52;C12N15/63;C07K16/40;C12Q1/25;C12Q1/68;A61K38/43
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本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體地說，本發(fā)明描述了一種新的多肽——磷酸核糖甘氨酰胺合成酶10.34，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發(fā)明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應(yīng)用。

核苷酸的生物合成對所有細胞來說都是極其重要的過程，因為細胞不能從周圍介質(zhì)中攝取核苷酸，而核苷酸卻是合成RNA和DNA所必須的前體。核苷酸的代謝降解的途徑對生物也很重要。有些遺傳缺陷癥引起這些途徑阻塞，會帶來嚴(yán)重的疾病。

磷酸核糖甘氨酰胺合成酶(GARS)催化嘌呤的生物從頭合成的第二步，將5-磷酸核糖胺連接至甘氨酸形成5’-磷酸核糖甘氨酰胺，這一反應(yīng)是ATP依賴的。在細菌中，GATS是一個單一功能的酶(由purD基因編碼)；在酵母中，它與甲酰甘氨酰胺核甘酸環(huán)化連接酶(AIRS)一起構(gòu)成一個雙功能酶(由ADE5，7基因)編碼；在高等真核生物中，上述二者與磷酸核糖甘氨酰胺甲酰轉(zhuǎn)移酶(GART)構(gòu)成一個三功能酶(GARS-AIRS-GART)。GARS的序列高度保守，其特征保守序列是：R-F-G-D-P-E-x-[QM]

通過基因芯片的分析發(fā)現(xiàn)，在正常腦、肝癌、肌肉、胎腦、胎腎，胎肺、胎肝、甲狀腺、胸腺、成人肝、肺、膠質(zhì)瘤中，本發(fā)明的多肽的表達譜與磷酸核糖甘氨酰胺合成酶的表達譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發(fā)明被命名為磷酸核糖甘氨酰胺合成酶10.34。

由于如上所述磷酸核糖甘氨酰胺合成酶10.34蛋白在調(diào)節(jié)細胞分裂和胚胎發(fā)育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調(diào)節(jié)過程中涉及大量的蛋白，因而本領(lǐng)域中一直需要鑒定更多參與這些過程的磷酸核糖甘氨酰胺合成酶10.34蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新磷酸核糖甘氨酰胺合成酶10.34蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態(tài)下的作用提供了基礎(chǔ)。這種蛋白可能構(gòu)成開發(fā)疾1病診斷和/或治療藥的基礎(chǔ)，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發(fā)明的一個目的是提供分離的新的多肽——磷酸核糖甘氨酰胺合成酶10.34以及其片段、類似物和衍生物。

本發(fā)明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發(fā)明的另一個目的是提供含有編碼磷酸核糖甘氨酰胺合成酶10.34的多核苷酸的重組載體。

本發(fā)明的另一個目的是提供含有編碼磷酸核糖甘氨酰胺合成酶10.34的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發(fā)明的另一個目的是提供生產(chǎn)磷酸核糖甘氨酰胺合成酶10.34的方法。

本發(fā)明的另一個目的是提供針對本發(fā)明的多肽——磷酸核糖甘氨酰胺合成酶10.34的抗體。

本發(fā)明的另一個目的是提供了針對本發(fā)明多肽——磷酸核糖甘氨酰胺合成酶10.34的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發(fā)明的另一個目的是提供診斷治療與磷酸核糖甘氨酰胺合成酶10.34異常相關(guān)的疾病的方法。

本發(fā)明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO：2氨基酸序列的多肽。

本發(fā)明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，該多核苷酸的序列是選自下組的一種：(a)具有SEQ?ID?NO：1中311-595位的序列；和(b)具有SEQ?ID?NO：1中1-1342位的序列。

本發(fā)明另外涉及一種含有本發(fā)明多核苷酸的載體，特別是表達載體；一種用該載體遺傳工程化的宿主細胞，包括轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)或轉(zhuǎn)染的宿主細胞；一種包括培養(yǎng)所述宿主細胞和回收表達產(chǎn)物的制備本發(fā)明多肽的方法。

本發(fā)明還涉及一種能與本發(fā)明多肽特異性結(jié)合的抗體。

本發(fā)明還涉及一種篩選的模擬、激活、拮抗或抑制磷酸核糖甘氨酰胺合成酶10.34蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本發(fā)明的多肽。本發(fā)明還涉及用該方法獲得的化合物。

本發(fā)明還涉及一種體外檢測與磷酸核糖甘氨酰胺合成酶10.34蛋白異常表達相關(guān)的疾病或疾病易感性的方法，包括檢測生物樣品中所述多肽或其編碼多核苷酸序列中的突變，或者檢測生物樣品中本發(fā)明多肽的量或生物活性。

本發(fā)明也涉及一種藥物組合物，它含有本發(fā)明多肽或其模擬物、激活劑、拮抗劑或抑制劑以及藥學(xué)上可接受的載體。