[發(fā)明專利]一種新的多肽——鋅指蛋白10.67和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 00127201.2
• 申請日: 2000-11-06
• 公開（公告）號: CN1352004A
• 公開（公告）日: 2002-06-05
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權(quán)）人: 上海博德基因開發(fā)有限公司
• 主分類號: C07K14/00
• 分類號: C07K14/00;C07K14/435;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/16;A61K38/17;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P3/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體地說，本發(fā)明描述了一種新的多肽——鋅指蛋白10.67，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發(fā)明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應(yīng)用。

鋅指蛋白7(ZNF7)的基因表現(xiàn)為多重轉(zhuǎn)錄，能夠在許多具有不同胚胎來源的人類細(xì)胞系中表達(dá)(Lania?L，Donti?E，Pannuti?A?et?al.，1990)。在人類細(xì)胞中，編碼鋅指蛋白7的基因位于染色體8q24.3，位于該基因周圍的染色體區(qū)域廣泛地甲基化。

鋅指蛋白7含有重復(fù)的鋅指結(jié)構(gòu)域，它是一種轉(zhuǎn)錄因子類似的多鋅指蛋白，包含了687個氨基酸殘基，其分子量大約為78Kd，它能夠在許多細(xì)胞系中表達(dá)。鋅指蛋白7包含了15個C2H2鋅指結(jié)構(gòu)域，占了整條蛋白的70％(Lania，L.，Donti，E.，Pannuti，A.Et?al，1990)，其鋅指結(jié)構(gòu)域與DNA和RNA結(jié)合鋅指有70％的序列相似性，并且與兩者的共同序列幾乎完全一致(Mattaj，I.W.，1993)。?

除了鋅指結(jié)構(gòu)域的核苷酸結(jié)合特性，鋅指還能夠介導(dǎo)蛋白和蛋白之間相互作用(Sun，L.，Liu，A.and?Georgopoulos，K.，1996)，也包括鋅指區(qū)域和亮氨酸拉鏈結(jié)構(gòu)域的相互作用(Diaz-Meco，M.，Municio，M.M.et?al.，1996)。然而，L7和鋅指蛋白7的相互作用界面保持著特異性。

雖然目前已經(jīng)獲得了鋅指蛋白7在核中的定位(Lania，L.，Donti，E.，Pannuti，A.Et?al，1990)，但是也不能排除它存在于細(xì)胞質(zhì)中的可能性。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)鋅指蛋白7能夠與真核細(xì)胞的核糖體共同純化，這就證明了其在核糖體上的定位，并且在核糖體中作為翻譯調(diào)節(jié)器其作用。

另外，在體外，鋅指蛋白7還是有絲分裂原活化的蛋白激酶的作用底物(Fukunaga，R.，and?Hunter，T.，1997)。但是，在體內(nèi)，有絲分裂原活化的蛋白激酶介導(dǎo)的鋅指蛋白7的磷酸化作用是會否影響鋅指蛋白7與L7的結(jié)合仍然無從考證。另外，在Burkitt淋巴瘤中，鋅指蛋白7表達(dá)的缺失導(dǎo)致腫瘤顯性(Feduchi?E，Gallego?MI，Lazo?PA，1994)。

通過基因芯片的分析發(fā)現(xiàn)，在正常腦、肝癌、肌肉、胎腦、胎腎，胎肺、胎肝、甲狀腺、胸腺、成人肝、肺、膠質(zhì)瘤中，本發(fā)明的多肽的表達(dá)譜與鋅指蛋白的表達(dá)譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發(fā)明被命名為鋅指蛋白10.67。

由于如上所述鋅指蛋白10.67蛋白在調(diào)節(jié)細(xì)胞分裂和胚胎發(fā)育等機(jī)體重要功能中起重要作用，而且相信這些調(diào)節(jié)過程中涉及大量的蛋白，因而本領(lǐng)域中一直需要鑒定更多參與這些過程的鋅指蛋白10.67蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新鋅指蛋白10.67蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態(tài)下的作用提供了基礎(chǔ)。這種蛋白可能構(gòu)成開發(fā)疾1病診斷和/或治療藥的基礎(chǔ)，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發(fā)明的一個目的是提供分離的新的多肽——鋅指蛋白10.67以及其片段、類似物和衍生物。

本發(fā)明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發(fā)明的另一個目的是提供含有編碼鋅指蛋白10.67的多核苷酸的重組載體。

本發(fā)明的另一個目的是提供含有編碼鋅指蛋白10.67的多核苷酸的基因工程化宿主細(xì)胞。

本發(fā)明的另一個目的是提供生產(chǎn)鋅指蛋白10.67的方法。

本發(fā)明的另一個目的是提供針對本發(fā)明的多肽——鋅指蛋白10.67的抗體。

本發(fā)明的另一個目的是提供了針對本發(fā)明多肽——鋅指蛋白10.67的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發(fā)明的另一個目的是提供診斷治療與鋅指蛋白10.67異常相關(guān)的疾病的方法。

本發(fā)明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO：2氨基酸序列的多肽。

本發(fā)明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補(bǔ)的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，該多核苷酸的序列是選自下組的一種：(a)具有SEQ?ID?NO：1中383-676位的序列；和(b)具有SEQ?ID?NO：1中1-1396位的序列。