[發明專利]一種新的多肽——人環磷酸鳥嘌呤抑制的磷酸二酯酶9.13和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00127149.0
• 申請日: 2000-11-02
• 公開（公告）號: CN1352285A
• 公開（公告）日: 2002-06-05
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C12N9/16
• 分類號: C12N9/16;C12N15/55;C12N15/63;C07K16/40;C12Q1/34;C12Q1/68;A61K38/46
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本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——人環磷酸鳥嘌呤抑制的磷酸二酯酶9.13，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

環核苷磷酸二脂酶(PDEs)是涉及到許多調控通路的超級酶家族，PDE3家族的特性是與cAMP高度親合、被cGMP所抑制，對特殊的抑制因子cilostamide與milrinone，敏感，通過磷酸化與活化響應胰島素及替代物以提高cAMP水平。PDE3家族又稱為cGMP-inhibited的cGI?PDE。(Miki?et?al.，1996；Lobbert?etal.，1996)。cGI?PDE的C端含有保守的結構域，它被證實是催化位點所在區域。PDE3中代表性的PDE3B與PDE3A在這個保守的催化結構域中有一44個氨基酸組成的插入子。這一插入子涉及到催化位點對cGMP的敏感性。(Meacci?E?etal.，1992；He?R?et?al.，1996)。cGIP1即PDE3B，由16個外顯子組成，在基因解碼區域存在G/A的多態性，在2個內含子(內含子5與內含子12)中有二核苷酸重復的多態性，PDE3B基因解碼1112個氨基酸，它與鼠PDE3B有81％的同源性。northern探針顯示它在許多脂肪儲存組織中較高表達，在肝、脾、肺、腎中低表達(Miki?et?al.，1996)。cGIP2即PDE3A，它的cAMP水解活性可被cGMP所抑制(Meacci?et?al.，1992)，PDE3A在血小板、心肌細胞中高表達，PDE3A的N端的缺失可提高cAMP水解活性。研究認為cGI?PDE的N端分歧涉及到底物識別的特異性(Tang?et?al.，1997)。Tang等人發現PDE3A在血小板、心肌細胞中高表達(Tang?et?al.，1997)。Miki與Lobbert等人認為PDE3B基因存在的染色體區域涉及肥胖癥與非胰島素依賴的糖尿病(Miki?etal.，1996；Lobbert?et?al.，1996)。研究發現，選擇性的cGI?PDE抑制因子可用于治療支氣管哮喘與慢性阻塞性肺病(Schmidt?D，et?al.，1999)其結構域相似于環磷酸鳥嘌呤抑制的磷酸二脂酶家族的特征性結構域---C端含有保守的結構域，它是催化位點所在區域；在這個保守的催化結構域中常有一44個氨基酸組成的插入子。基于以上各點，故認為本發明的新基因為一編碼人環磷酸鳥嘌呤抑制的磷酸二脂酶家族的基因，命名為人環磷酸鳥嘌呤抑制的磷酸二脂酶17。并以此推斷其具有環磷酸鳥嘌呤抑制的磷酸二脂酶家族相似的生物學功能。編碼人環磷酸鳥嘌呤抑制的磷酸二脂酶17的多聚核苷酸，及其所編碼的人環磷酸鳥嘌呤抑制的磷酸二脂酶17的發現為研究細胞在正常及病理條件下的分化、增殖的生理生化過程提供了一種方法，也為診斷、治療與細胞分化增殖紊亂而造成的疾病包括癌癥提供了一種新途徑。

通過基因芯片的分析發現，在正常腦、肝癌、肌肉、胎腦、胎腎，胎肺、胎肝、甲狀腺、胸腺、成人肝、肺、膠質瘤中，本發明的多肽的表達譜與人環磷酸鳥嘌呤抑制的磷酸二酯酶的表達譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發明被命名為人環磷酸鳥嘌呤抑制的磷酸二酯酶9.13。

由于如上所述人環磷酸鳥嘌呤抑制的磷酸二酯酶9.13蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人環磷酸鳥嘌呤抑制的磷酸二酯酶9.13蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人環磷酸鳥嘌呤抑制的磷酸二酯酶9.13蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾1病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽——人環磷酸鳥嘌呤抑制的磷酸二酯酶9.13以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人環磷酸鳥嘌呤抑制的磷酸二酯酶9.13的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人環磷酸鳥嘌呤抑制的磷酸二酯酶9.13的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產人環磷酸鳥嘌呤抑制的磷酸二酯酶9.13的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽——人環磷酸鳥嘌呤抑制的磷酸二酯酶9.13的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽——人環磷酸鳥嘌呤抑制的磷酸二酯酶9.13的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。