[發明專利]一種新的多肽——人層粘連蛋白8.91和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00127138.5
• 申請日: 2000-11-02
• 公開（公告）號: CN1352053A
• 公開（公告）日: 2002-06-05
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K14/00;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/17;A61K38/16;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18;A61P43/00
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本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——人層粘連蛋白8.91，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

層粘連蛋白參與很多的生物學活動，例如細胞連接，有絲分裂發生，細胞轉移以及細胞分化。

層粘連蛋白始基底膜的非膠原組成成分[Timpl，R.，Rohde，H.，Robey，.G.，etal.，1979，J.Biol.Chem.254，9

933-9937][Hogan，B.L.M.，Barlow，D.P.，and?Kurkinen，M.1984，108，60-69，Pitman?Books?Ltd.，London]。該分子由3條不同的鏈組成，A，B1和B2，它們通過二硫鍵彼此連接[Cooper，A.R.，Kurkinen，M.，Taylo

r，A.，and?Hogan，B.L.M.1981，Eur.j.Biochem.119，189-197]。層粘連蛋白大分子的3個短臂和1個長臂組成一個不對稱的十字架結構。每一個短臂又包含兩個小球結構，長臂的末端則有1個大球。電鏡觀察表明每一條鏈的N末端形成一條短臂，每一條鏈的C末端則形成一個轉角結構，A鏈凸進長臂的大球結構內部[Timpl，R.，and?Dziadek，M.1986，Int.Rev.Exp.Pathol.29，1-112]。B1鏈是一個包含一條21個氨基酸殘基信號肽由1786個氨基酸殘基組成的多結構域多肽。在C末端由夾雜著一個短的富含半胱氨酸結構域α的轉角結構域I和轉角結構域II組成。結構域III和V也包含幾個相似的富含半胱氨酸重復子。序列分析表明B1鏈和B2鏈是兩個層粘連蛋白，它們由相似的多結構域二級結構，這些二級結構包括富含半胱氨酸重復子，球狀結構域和轉角區域。

B2鏈有1576個氨基酸殘基，比B1鏈少189個氨基酸殘基，這些少的氨基酸殘基主要位于鏈的C末端而形成長臂的轉角結構[Sasaki，M.，Kato，S.，Kohno，K.，Martin，G.R.，and?Yamada，Y.1987，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.84，935-939]。B1鏈的結構域α以及包含6個半胱氨酸的唯一的33個氨基酸殘基序列在B2鏈中沒有相對應的結構，而B1鏈中被結構域α分離的結構域I和結構域II在B2鏈中卻是連續的。B2鏈也包含典型的盤繞卷曲結構的六花瓣重復子，這些重復子有幾乎一樣的長度，并且可能和A鏈形成轉角結構。結構域III和V由幾個富含半胱氨酸類型A同系物拷貝組成。

通過基因芯片的分析發現，在正常腦、肝癌、肌肉、胎腦、胎腎，胎肺、胎肝、甲狀腺、胸腺、成人肝、肺、膠質瘤中，本發明的多肽的表達譜與層粘連蛋白的表達譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發明被命名為人層粘連蛋白8.91。

由于如上所述人層粘連蛋白8.91蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人層粘連蛋白8.91蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人層粘連蛋白8.91蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾1病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽——人層粘連蛋白8.91以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人層粘連蛋白8.91的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人層粘連蛋白8.91的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產人層粘連蛋白8.91的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽——人層粘連蛋白8.91的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽——人層粘連蛋白8.91的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與人層粘連蛋白8.91異常相關的疾病的方法。

本發明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO：2氨基酸序列的多肽。

本發明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；