[發(fā)明專利]一種新的多肽——醛－酮還原酶8.8和編碼這種多肽的多核苷酸

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 00125844.3
• 申請(qǐng)日: 2000-10-26
• 公開（公告）號(hào): CN1351146A
• 公開（公告）日: 2002-05-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 毛裕民;謝毅
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海博德基因開發(fā)有限公司
• 主分類號(hào): C12N9/02
• 分類號(hào): C12N9/02;C12N15/53;C12N15/63;C07K16/40;C12Q1/26;C12Q1/68;A61K38/44
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體地說(shuō)，本發(fā)明描述了一種新的多肽——醛-酮還原酶8.8，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發(fā)明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應(yīng)用。

醛-酮還原酶家族包括結(jié)構(gòu)與功能上相關(guān)的NADPH-依賴的氧化還原酶及一些其他的酶類：醛還原酶；醛糖還原酶；3-alpha-羥基類固醇脫氫酶，通過(guò)將5-alpha-二氫睪酮轉(zhuǎn)變?yōu)?-alpha-雄烷二醇來(lái)終止雄激素反應(yīng)；前列腺素F合酶，催化前列腺素H2與D2還原為F2-alpha；十氯酮還原酶，還原殺蟲劑十氯酮(商品名Kepone)為對(duì)應(yīng)的乙醇；2，5-二酮-D-葡糖酸還原酶，催化2，5-二酮葡糖酸為2-酮-L-葡糖酸，一種產(chǎn)生抗壞血酸的主要中間物；反-1，2-二氫苯-1，2-二醇脫氫酶；3-氧代-5-beta-固醇4-脫氫酶，催化delta(4)-3-氧代固醇的還原(Bohren?K.M.，Bullock?B.，WermuthB.，Gabbay?K.H.，J.Biol.Chem.264：9547-9551(1989))。上述蛋白都具有約300個(gè)氨基酸殘基。該家族成員具有三個(gè)保守的特征序列模板：G-[FY]-R-[HSAL]-[LIVMF]-D-[STAGC]-[AS]-x(5)-E-x(2)-[LIVM]-G，位于N-端；[LIVMFY]-x(9)-[KREQ]-x-[LIVM]-G-[LIVM]-[SC]-N-[FY]，位于中間部分；[LIVM]-[PAIV]-[KR]-[ST]-x(4)-R-x(2)-[GSTAEQK]-[NSL]-x(2)-[LIVMFA]，該段模板位于C-端，以賴氨酸殘基為中心，這個(gè)K是一個(gè)活性位點(diǎn)殘基，它在醛糖以及醛還原酶中的化學(xué)修飾影響催化效果(Bruce?N.C.，Willey?D.L.，Coulson?A.F.W.，Jeffery?J.，Biochem.J.299：805-811(1994))。

本發(fā)明的多肽含有上述兩個(gè)家族的特征序列模板，且具有相似的生物活性，因而被認(rèn)為是醛/酮還原酶家族的新成員，其表達(dá)異常將引發(fā)唐氏綜合征等疾病，并與癡呆的惡化有關(guān)，該多肽及其抑制劑，激動(dòng)劑，拮抗劑可用與診斷兼防治與醛糖還原有關(guān)的疾病，例如家族性遺傳性非息肉病結(jié)腸癌(HNPCC)等疾病。

由于如上所述醛-酮還原酶8.8蛋白在機(jī)體內(nèi)重要功能中起重要作用，而且相信這些調(diào)節(jié)過(guò)程中涉及大量的蛋白，因而本領(lǐng)域中一直需要鑒定更多參與這些過(guò)程的醛-酮還原酶8.8蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新醛-酮還原酶8.8蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態(tài)下的作用提供了基礎(chǔ)。這種蛋白可能構(gòu)成開發(fā)疾病診斷和/或治療藥的基礎(chǔ)，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發(fā)明的一個(gè)目的是提供分離的新的多肽——醛-酮還原酶8.8以及其片段、類似物和衍生物。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供含有編碼醛-酮還原酶8.8的多核苷酸的重組載體。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供含有編碼醛-酮還原酶8.8的多核苷酸的基因工程化宿主細(xì)胞。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供生產(chǎn)醛-酮還原酶8.8的方法。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供針對(duì)本發(fā)明的多肽——醛-酮還原酶8.8的抗體。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供了針對(duì)本發(fā)明多肽——醛-酮還原酶8.8的模擬化合物、拮抗劑、激動(dòng)劑、抑制劑。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供診斷治療與醛-酮還原酶8.8異常相關(guān)的疾病的方法。

本發(fā)明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO：2氨基酸序列的多肽。

本發(fā)明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補(bǔ)的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，該多核苷酸的序列是選自下組的一種：(a)具有SEQ?ID?NO：1中414-656位的序列；和(b)具有SEQ?ID?NO：1中1-1077位的序列。

本發(fā)明另外涉及一種含有本發(fā)明多核苷酸的載體，特別是表達(dá)載體；一種用該載體遺傳工程化的宿主細(xì)胞，包括轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)或轉(zhuǎn)染的宿主細(xì)胞；一種包括培養(yǎng)所述宿主細(xì)胞和回收表達(dá)產(chǎn)物的制備本發(fā)明多肽的方法。

本發(fā)明還涉及一種能與本發(fā)明多肽特異性結(jié)合的抗體。