[發明專利]一種新的多肽——人LepA蛋白12.32和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00125825.7
• 申請日: 2000-10-26
• 公開（公告）號: CN1351059A
• 公開（公告）日: 2002-05-29
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K14/00;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/17;A61K38/16;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——人LepA蛋白12.32，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

GTP酶是生物體內一類常見的酶，催化相關組織細胞GTP水解反應的進行，是體內核蛋白轉運所必需的一類重要的酶。GTP酶在生物體內與GTP酶激活蛋白協同作用，以發揮其正常的催化活性，促使其完成相應的生理學功能。GTP酶激活蛋白在生物體內的定位決定了在何種組織將發生由GTP酶催化的GTP水解反應。由此可知，GTP酶生物在體內與相應的GTP酶激活蛋白協同作用，調控著體內相關蛋白在細胞內的轉運。

人們已從酵母、人等多種生物體內克隆得到了各種不同來源的GTP酶，所有這些酶組成了一龐大的蛋白家族，即GTP酶超家族。研究發現，所有該蛋白家族的成員均在生物體內參與調控各種相關的細胞核蛋白的轉運過程。在各種不同生物體內，GTP酶均與不同的GTP酶激活蛋白結合，以激活其在體內的催化活性，從而催化GTP水解反應完成，進而調控各種與之相關的細胞核蛋白轉運，將蛋白運入細胞核，以作為細胞核的重要組成成分，參與形成正常的細胞核結構。

1996年，Georg等人又從線蟲中克隆得到了一LepA蛋白，研究發現，該蛋白與大腸桿菌中的LepA蛋白具有較高的同源性，他們的蛋白序列中均含有四個高度保守的序列基序----G1、G2、G3及G4，且與延伸因子相似的GTP酶非常相似，其亦為GTP酶超家族中的成員，且與該家族中的其它成員具有相似的生物學功能，在體內參與調控相關組織細胞核蛋白的轉運。其突變或表達異常通常將導致相關組織細胞內蛋白轉運的異常，進而引發各種相關的疾病[GeorgHomuth，Marianne?Heinemann?et?al.，1996，Microbiology，142：1641-1649]。

通過基因芯片的分析發現，在胎腦、原液培養的L02細胞株、0.5％FBS培養液37.C饑餓的L02細胞株、胎腎、直腸癌，胎肝、成人肝、肝癌、胎肺、胎脾、胎心、成人心、成人睪丸、胎胃、成人胃中，本發明的多肽的表達譜與人LepA蛋白的表達譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發明被命名為人LepA蛋白12.32。

由于如上所述人LepA蛋白12.32蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人LepA蛋白12.32蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人LepA蛋白12.32蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾1病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽——人LepA蛋白12.32以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人LepA蛋白12.32的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人LepA蛋白12.32的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產人LepA蛋白12.32的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽——人LepA蛋白12.32的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽——人LepA蛋白12.32的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與人LepA蛋白12.32異常相關的疾病的方法。

本發明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO：2氨基酸序列的多肽。

本發明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，該多核苷酸的序列是選自下組的一種：(a)具有SEQ?ID?NO：1中209-547位的序列；和(b)具有SEQ?ID?NO：1中1-928位的序列。