[發明專利]一種新的多肽——胞液重組細胞抗原蛋白APK131.57和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00125821.4
• 申請日: 2000-10-26
• 公開（公告）號: CN1351025A
• 公開（公告）日: 2002-05-29
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C07K14/00
• 分類號: C07K14/00;C07K14/435;C07K16/00;C07K16/18;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/16;A61K38/17;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
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• 代理人: 暫無信息

本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——胞液重組細胞抗原蛋白APK131.57，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

MAB?K1是一種鼠IgGlκ單克隆抗體(MAB)，它由卵巢癌細胞株免疫的鼠雜種細胞產生。這一抗體可識別正常間皮上的一種分化抗原，它也可以與人類許多上皮卵巢癌、鱗狀細胞癌和所有惡性間皮瘤強烈、均一地作用。

胞液重組細胞抗原蛋白(Cytosolic?recombinant?antigenic?protein，APK1)作為一種腫瘤抗原，由癌基因過分表達或正常基因突變而來。腫瘤抗原可與正常蛋白擁有相同的抗原決定基。有3種蛋白可與MAB?K1相作用：APK1，CAK1，CAK2。APK1由MAb?K1抗體從卵巢癌(OVCAR-3)細胞株中識別出來。APK1編碼基因pAPK1長2444bp，包含一個789bp的開放閱讀框架(ORF)，其編碼蛋白為一條含263個氨基酸的多肽。

APK1在體外和大腸桿菌體內表達的可與MAB?K1作用的多肽分別為29和30KDa，與ORF多肽的近似分子量相符。APK1作為一個重組抗原，它在大腸桿菌體內表達的29和30KDa多肽專一性地與MAB?K1反應。此重組蛋白的鼠抗血清與OVCAR-3中的同一胞液蛋白劇烈反應，而29到30?Kda膜蛋白在MAB?K1激活CAK1帶時在同一位點轉移，與其只有微弱反應。CAK1是一個膜包圍蛋白，而APK1是一個可溶性蛋白。CAK1是一種MAB?K1識別的抗原，它是一個約40Kda的細胞表面糖蛋白。APK1在腫瘤細胞株中的表達與CAK1在其中的水平有關。(Kai?Chang，et.al，Int.J.Cancer，1994，57：90-97)

胞液重組細胞抗原蛋白APK1作為一種腫瘤抗原，與一些腫瘤的發生有關，對APK1編碼基因pAPK1表達的研究對于了解腫瘤的發生以及其診斷和治療有重要意義。

通過基因芯片的分析發現，在胎腦、原液培養的L02細胞株、0.5％FBS培養液37.C饑餓的L02細胞株、胎腎、直腸癌，胎肝、成人肝、肝癌、胎肺、胎脾、胎心、成人心、成人睪丸、胎胃、成人胃中，本發明的多肽的表達譜與胞液重組細胞抗原蛋白APK1的表達譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發明被命名為胞液重組細胞抗原蛋白APK131.57。

由于如上所述胞液重組細胞抗原蛋白APK131.57蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的胞液重組細胞抗原蛋白APK131.57蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新胞液重組細胞抗原蛋白APK131.57蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾1病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽——胞液重組細胞抗原蛋白APK131.57以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼胞液重組細胞抗原蛋白APK131.57的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼胞液重組細胞抗原蛋白APK131.57的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產胞液重組細胞抗原蛋白APK131.57的方法。?

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽——胞液重組細胞抗原蛋白APK131.57的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽——胞液重組細胞抗原蛋白APK131.57的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與胞液重組細胞抗原蛋白APK131.57異常相關的疾病的方法。

本發明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO：2氨基酸序列的多肽。

本發明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。