[發明專利]一種新的多肽——人核苷酸切除修復蛋白10.67和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00125806.0
• 申請日: 2000-10-26
• 公開（公告）號: CN1351048A
• 公開（公告）日: 2002-05-29
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K14/00;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/17;A61K38/16;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P43/00
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本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——人核苷酸切除修復蛋白10.67，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

DNA分子要求保持高度的精確性和完整性。生物體內外許多因素都能造成DNA分子結構的損傷，如電離輻射，紫外線，烷化劑，氧化劑等。一種因素可能造成許多類型的損傷，一種類型的損傷也可能來自不同因素的作用。細胞中不但有能精密復制DNA分子的機制，還有能夠修復發生錯誤的DNA的系統。這些DNA修復系統保護細胞不受突變，復制出錯，基因組不穩定和細胞死亡等。這些系統的失常會引發癌癥和衰老。

一種最重要的DNA修復通路是核苷酸切除修復(nucleotide?excisionrepair，NER)。這種修復機制修復大段的DNA損傷。這些損傷包括紫外線、電離輻射形成的大段損傷等。切除修復包括五個步驟：識別，切割，降解聚合以及最后的連接。識別步驟需要ERCC(切除修復交叉補足基因excision-repaircross-complementing)，XPA和XPF等基因產物與TFIIH轉錄因子相互作用。雙切割步驟也需要ERCC和XPG等基因產物的參與。

ERCC基因包括幾種，ERCC1、ERCC2、ERCC3、ERCC4、ERCC5和ERCC6等。ERCC3與著色性干皮病(xeroderma?pigmentosum，XP)互補基團B相同。著色性干皮病互補基團B的病人同時具有著色性干皮病和Cockayne綜合癥(Cockaynesyndrome)的臨床表現。【Mutat.Res.106：347-356，1982】ERCC3缺乏的嚙齒類動物表現出人類的著色性干皮病的表型。【.Cell?62：777-791，1990】有可能同時發生的著色性干皮病/Cockayne綜合癥癥狀與同時發生的轉錄/修復缺陷相關。.【J.Biol.Chem.271：15898-15904，1996.】試驗表明，ERCC4可以有效地修復嚙齒類中的NER突變，并且在這些突變中，ERCC4的蛋白水平降低了。在XP-F患者的細胞中，ERCC4的蛋白水平下降到小于5％。ERCC4與MEI-9的相似性(40％)提示了ERCC4與細胞的減數分裂有關。【Mol?Cell?Biol?1996Nov；16(11)：6553-62】

核苷酸切除修復通路的缺陷除了與著色性干皮病和Cockayne綜合癥有關以外，還與trichothiodystrophy(TTD)相關。【.Am.J.Hum.Genet.60：320-329，1997】

通過基因芯片的分析發現，在胎腦、原液培養的L02細胞株、0.5％FBS培養液37.C饑餓的L02細胞株、胎腎、直腸癌，胎肝、成人肝、肝癌、胎肺、胎脾、胎心、成人心、成人睪丸、胎胃、成人胃中，本發明的多肽的表達譜與人核苷酸切除修復蛋白的表達譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發明被命名為人核苷酸切除修復蛋白10.67。

由于如上所述人核苷酸切除修復蛋白10.67蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人核苷酸切除修復蛋白10.67蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人核苷酸切除修復蛋白10.67蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾1病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽——人核苷酸切除修復蛋白10.67以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人核苷酸切除修復蛋白10.67的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人核苷酸切除修復蛋白10.67的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產人核苷酸切除修復蛋白10.67的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽——人核苷酸切除修復蛋白10.67的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽——人核苷酸切除修復蛋白10.67的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與人核苷酸切除修復蛋白10.67異常相關的疾病的方法。