[發明專利]一種新的多肽——人蛋白酪氨酸磷酸化酶10.01和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00125790.0
• 申請日: 2000-10-26
• 公開（公告）號: CN1351163A
• 公開（公告）日: 2002-05-29
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C12N9/26
• 分類號: C12N9/26;C12N15/56;C12N15/63;C07K16/40;C12Q1/34;C12Q1/68;A61K38/47
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——人蛋白酪氨酸磷酸化酶10.01，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

蛋白酪氨酸殘基的磷酸化過程是生物體內控制細胞生長、分化及發育等多種信號轉導過程的重要調控機制。人們早就開始研究酪氨酸激酶及蛋白酪氨酸磷酸化酶，但對酪氨酸激酶的研究較多些，而最近幾年才開始重視對蛋白酪氨酸磷酸化酶的研究。蛋白酪氨酸磷酸化酶在體內與酪氨酸激酶協同作用，在細胞正常生理特征維持過程中起重要的調節作用。

1988年，人們從人胎盤中分離得到了第一個蛋白酪氨酸磷酸化酶；1990年，人們有分離得到了該酶的cDNA序列；隨后，人們開始了對該酶的研究。1990年，人們從酵母到人等各種真核細胞中均克隆得到該酶家族的成員。所有這些酶的蛋白序列均有較高的相似性，蛋白序列中均含有一個或多個蛋白酪氨酸磷酸化酶結構域。該蛋白家族的成員在T細胞中高表達，調控著T細胞的活性，與生物體內一些免疫系統紊亂性疾病的發生密切相關[Tomas?Mustelin，JohannesBrockdorff?et?al.，1999，Cell?Signal，11：637-650]。

所有的蛋白酪氨酸磷酸化酶的蛋白序列中均含有一個或多個高度保守的特征性序列片段：HCXXGXXR。其中，序列片段中的半胱氨酸殘基在酶活性構型的形成及催化活性的發揮過程中起著極為重要的調節作用。其突變將導致酶的失活及功能異常，從而引發各種與之相關的疾病。該酶在生物體各種淋巴細胞活性調控過程中起重要調節作用，其通常與生物體內免疫紊亂性疾病、惡性淋巴系統疾病、白血病、各種免疫缺陷型疾病及相關組織的惡性腫瘤及癌癥等疾病的發生密切相關。

由于如上所述人蛋白酪氨酸磷酸化酶15蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人蛋白酪氨酸磷酸化酶15蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人蛋白酪氨酸磷酸化酶15蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的

通過基因芯片的分析發現，在胎腦、原液培養的L02細胞株、0.5％FBS培養液37.C饑餓的L02細胞株、胎腎、直腸癌，胎肝、成人肝、肝癌、胎肺、胎脾、胎心、成人心、成人睪丸、胎胃、成人胃中，本發明的多肽的表達譜與人蛋白酪氨酸磷酸化酶的表達譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發明被命名為人蛋白酪氨酸磷酸化酶10.01。

由于如上所述人蛋白酪氨酸磷酸化酶10.01蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人蛋白酪氨酸磷酸化酶10.01蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人蛋白酪氨酸磷酸化酶10.01蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾1病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽——人蛋白酪氨酸磷酸化酶10.01以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人蛋白酪氨酸磷酸化酶10.01的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人蛋白酪氨酸磷酸化酶10.01的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產人蛋白酪氨酸磷酸化酶10.01的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽——人蛋白酪氨酸磷酸化酶10.01的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽——人蛋白酪氨酸磷酸化酶10.01的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與人蛋白酪氨酸磷酸化酶10.01異常相關的疾病的方法。

本發明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO：2氨基酸序列的多肽。

本發明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。